ВИЧ-ГЕНОМ - Четвертая крупная ошибка

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 9 из 20Следующая ⇒

Комментарии

1.Материал на электронных микрофотографиях (а) и (b) происходил из «зараженных» культур. Будучи очищенным градиентом плотности, этот материал должен был бы состоять только из очищенных частиц ретровируса, но все три микрофотографии обозначены как «Очищенные [клеточные] везикулы».

2. Средний диаметр пяти частиц, обозначенных стрелками как «Вирионы», равен 140 нМ. Это превышает таксономически определённый диаметр ретровирусных частиц (100-120 нМ в 1980-х годах, а затем пересмотренный до 80-100 нМ¹⁶³). Кроме того, у пяти «Вирионов» отсутствуют конусообразные сердечники и боковые тела, требуемые лентивирусной морфологией. Ни у кого нет шипов/ручек, которые считаются абсолютным требованием к инфекционности (см. выше).

3. На электронной микрофотографии (с) «Очищенные везикулы», неинфицированный материал, в (а) и (b) имеются частицы, похожие на «ВИЧ» «Вирионы». На электронных микрофотографиях Бесса (не показаны) объекты, обозначенные как ВИЧ, имеют средний диаметр 234 нМ, и ни один из них не имеет диаметр менее 160 нМ. На этом основании, они не могут быть ретровирусами.¹⁶⁴ Когда мы отправили электронную почту Бессу, он согласился, что частицы имеют этот размер, но он не смог дать объяснения. Он сказал, что будет консультироваться со своими электронными микроскопистами и сообщить нам о результатах. К сожалению, он этого не сделал.

4. Естественно, учёные мотивированы, чтобы представить свои лучшие результаты, а лучшие электронные микрофотографии обеих групп показывают, что, на самом деле, «очищенный вирус» состоит из разнообразной коллекции клеточных микропузырьков^{165, 166} и других обломков различной формы и размеров, ни один из которых не представляет собой частицу, несущую полный набор морфологических признаков, требуемых лентивирусами. Не верен даже размер частиц, обозначенный Международным комитетом по таксономии вирусов.

5. В статью Бесса включён белковый электрофорез¹⁶⁷ «ВИЧ-инфицированного» и неинфицированный очищенный материал градиента плотности. Если «ВИЧ-инфицированный» материал содержит ВИЧ-ретровирус, а также клеточный материал (микропузырьки), то, по сравнению с неинфицированным материалом, он должен содержать дополнительные 15 белков, которые, как говорят, являются ВИЧ-вирионами. Однако данные Бесса показывают, что дополнительных белков нет. Помимо количественных различий в трех белках, которые Бесс отметил как p6/7, p17 и p24 в «ВИЧ-инфицированном» материале (B&C), белковые профили B&C и в неинфицированных препаратах (A) идентичны. Если дополнительных белков нет, то нет и ВИЧ-белков. Если ВИЧ-белков нет, ВИЧ отсутствует. Частицы, обозначенные как «ВИЧ», представляют собой не что иное, как клеточные микропузырьки.¹⁶⁸

У Бесса и других белковые профили материала, находящегося в полосе градиента плотности сахарозы из супернатантов культурA = неинфицированные; B и C = «ВИЧ-инфицированные»; актин и HLA DR = клеточные белки; kDa = молекулярно-весовая шкала.

В переписке по электронной почте Джулиан Бесс сказал пертской группе: «Мы согласны с тем, что вы можете прийти к выводу, что у гель-электрофоретических образцов имеются только количественные различия между ВИЧ и микропузырьками [клеточный обломки]». Если Бесс соглашается с тем, что ВИЧ и клеточный материал содержат одно и то же количество белков, то он также должен согласиться, что «вы можете прийти к выводу», что нет ВИЧ-белков и, следовательно, нет ВИЧ.

Бесс также сказал пертской группе: «Мы не определяли тождества полос [p6/7, p17 и p24] в этом конкретном геле ... эти ярлыки были добавлены, когда один из рецензентов попросил их ... Он чувствовал, что это будет помогать ориентировать читателей, смотрящих на изображение».

Белки p6/7, p17 и p24, которые Бесс и его рецензенты считают ВИЧ-белками, также присутствуют в меньших количествах в неинфицированном материале. Более высокие концентрации (более темные полосы) в «ВИЧ-инфицированном» материале могут быть объяснены различиями в способе получения и поддержания клеточных культур. Поскольку существование p24 было доказано Монтанье и возникло из материала градиента плотности, в котором не было частиц ретровируса, он может быть только клеточным белком. И так как p6/7, p17 и p24 получены из более крупного p53-«полипротеина», p6/7 и p17 также являются клеточными белками.

6. В 1987 году Хендерсон (Henderson) и его коллеги¹⁶⁹ показали, что «ВИЧ»-белки в области p30-p32 и p34-p36 являются соответственно альфа- и бета-цепями клеточного белка HLA-DR. Это подтверждается аннотацией к полоскам Бесса  и др.

7. Бесс назвал белок с молекулярной массой 41К актиом как в «очищенном вирусе», так и в неинфицированном материале. Актин является клеточным белком.

8. В любом «ВИЧ-инфицированном» электрофорезе нет белка p41, названного «ВИЧ».

9. В 1989 году было показано, что «ВИЧ»-белки p120 и p160 являются полимерами белка p41.¹⁷⁰ Никакие белки этих молекулярных масс не были отмечены как «ВИЧ» Бессом и его коллегами.

10. В электрофоретических полосах Бесса не идентифицирован белок p51/p66 (обратная транскриптаза). В итоге, электрофоретические данные Бесса заключают в себе две поразительные особенности. Во-первых, градиенты плотности «очищенных» супернатантов, полученных культивированием (клетки + «вирус») и (клетки - «вирус»), дают качественно идентичные белковые профили. Любые различия являются количественными. Во-вторых, только три белка маркированы как «ВИЧ». Эти белки p6/7, p17 и p24 присутствуют в большем количестве в «заражённом» материале, но более высокая концентрация не доказывает, что они являются вирусными. Бесс признался, что у него нет доказательств того, что они были вирусными. Это означает, что «ВИЧ»-белки являются клеточными белками. Поскольку нет «белков ВИЧ», то антитела к ВИЧ не могут быть антителами к ВИЧ и, следовательно, нет тестов на антитела к ВИЧ.^{100, 108-113, 115, 117, 171-176}. Роль генов (генома) заключается в том, чтобы проинструктировать синтез белков. Если нет «ВИЧ»-белков, как может быть геном «ВИЧ»? Теперь мы рассмотрим это доказательство.

Важно понимать, что существование «ВИЧ» и ВИЧ/СПИД-теории были приняты до того, как были опубликованы какие-либо данные о последовательностях нуклеиновой кислоты, заявленных как геном ВИЧ.

Как было сказано ранее, ретровирусы имеют РНК-геном и реплицируются (копируются) через промежуточное звено ДНК, называемое «провирусом». Структура ДНК и РНК хорошо известна. ДНК представляет собой двухцепочечный полимер нуклеотидов, где каждый нуклеотид состоит из азотистого основания, связанного с дезоксирибозой, связанной с фосфорной кислотой. В ДНК есть четыре основания - Гуанин, Цитозин, Аденин и Тимин. Две нити в ДНК удерживаются вместе водородной связью между основаниями на противоположных цепях. Водородные связи относительно слабы и легко разрушаются, что позволяет разделить нити. Нуклеотиды на соседних цепях парами соединяются в соответствии с правилом спаривания оснований: G-пары с C и A-пары с T (GC-AT). Последовательность одной цепи предсказывает http://www.bugaco.com/calculators/dna_reverse_complement.php последовательность комплементарной цепи. РНК представляет собой одноцепочечный полинуклеотид, причем сахар представляет собой рибозу, а азотистое основание урацил заменяет тимин. РНК-цепь может связываться с одной цепью ДНК, следуя правилу связей G с C и A с U (GC-AU).

То, что может быть не столь хорошо известно, - это гибридизация нуклеиновых кислот, лабораторная техника, которая широко использовалась при исследовании ВИЧ для определения наличия или отсутствия данной ДНК или РНК in vitro (в пробирке) и in vivo (в живом организме). Эта техника основана на комплементарном спаривании оснований. Радиоактивно меченую нуклеиновую кислоту известной последовательности (зонд) добавляют к смеси неизвестных нуклеиновых кислот. Если присутствует ДНК или РНК, комплементарная зонду, две нити связываются (гибридизуются). Их объединение обнаруживается авторадиографически, хотя в настоящее время радиоактивное обнаружение в значительной степени заменено использованием более безопасных флуоресцентных или хромогенных маркеров. И зонд, и гибридизация ДНК часто упоминаются как «положительный сигнал». Обнаружение ДНК путём гибридизации называется Саузерн-блоттингом после его изобретения биохимиком Эдвином Меллором Саузерном (Edwin Mellor Southern). Подобное обнаружение РНК называется Нозерн-блоттингом.¹⁷⁷ Исследования крупномасштабной гибридизации требуют большого количества ДНК-зондов.

Это достигается путём клонирования. ДНК вставляется в ДНК микроорганизма, последний называется клонирующим вектором, обычно геном бактериофага (вирус, который заражает бактерии, также называемый фагом), часто фаг λ (лямбда). После введения «рекомбинантной» ДНК в микроорганизм, часто бактерии Escherichia coli (E. coli), бактерия культивируется, что умножает фаг с его вставленной ДНК. Затем извлекают ДНК-вставку.

Большинство геномов слишком длинны для работы и, таким образом, сначала перевариваются (разрезаются на части, соответствующего размера) ферментами, известными как рестрикционные ферменты. Это приводит к фрагментам ДНК, достаточно малым для включения в отдельные векторы, но не настолько малым, чтобы отдельные гены не делились. Коллекция различных последовательностей ДНК называется библиотекой ДНК.¹⁷⁸

Согласно центральной догме биологии, ДНК служит в качестве матрицы для синтеза РНК, которая, в свою очередь, направляет синтез белков. ДНК→ РНК→ белок. Многие типы РНК синтезируются в ядре, и большая часть их деградирует, а другие модифицируются и экспортируются в цитоплазму. Одним из последних является РНК, модифицированная полиаденилированием. Полиаденилирование представляет собой добавление аденинового полимера, состоящего из 100-200 адениновых нуклеотидов, на один конец молекулы РНК. Адениновый полимер упоминается как «поли(А) хвост» и РНК как поли(А) РНК. Поли(А) РНК также называют информационной РНК (mРНК), поскольку она направляет синтез белков (трансляцию) в цитоплазму.¹⁷⁹

ВИЧ-экперты утверждают, что можно продуцировать ВИЧ-частицы путём введения немодифицированной ВИЧ ДНК (обратной транскрипции предполагаемой ВИЧ РНК, сДНК) в клеточные культуры. Эксперты называют такую ДНК, как «инфекционный молекулярный клон». Другими словами, ДНК молекула → ретровирусные частицы.  Это не следует путать с молекулярным клонированием ДНК, то есть ДНК молекула → ДНК молекула. Чтобы квалифицировать молекулярный клон как инфекционный, вводимая ДНК должна приводить к образованию вирусных частиц, несущих одни и те же морфологические признаки и биохимические компоненты, в качестве вирусных частиц, из которых была получена родительская РНК (сДНК).

Поскольку молекулярная биология стала привлекательной, важно не приравнивать её к вирусологии. ДНК, РНК и белки представляют собой большие молекулы, состоящие из повторяющихся субъединиц (полимеров). Вирусы – это инфекционные частицы из нуклеиновой кислоты, белков и других молекул. Как учит своих студентов Винсент Раканиелло (Vincent Racaniello): «Вирус это не то же самое, что вирусная [нуклеиновой кислоты] последовательность». Если вы изолируете 200 нуклеотидных последовательностей из образца, это не означает, что присутствует вирус».¹⁸⁰ На самом деле, этот вопрос был специально рассмотрен в случае Парензе (Parenzee) на апелляционном слушании⁸¹, когда прокурор представил документ, озаглавленный «последовательная идентификация микробных патогенов: пересмотр постулатов Коха"¹⁸² http://www.life.umd.edu/classroom/bsci424/BSCI223WebSiteFiles/KochsPostulates.htm

в качестве доказательства того, что генетические методы могут быть использованы для доказательства существования вируса. В ходе перекрёстного исследования один из нас (EPE – Элени Пападопулос Элеопулос)  зачитала суду то, что авторы заявили в своей статье: «...при наличии только усиленной последовательности биологическая роль или даже существование этих предполагаемых микроорганизмов остаётся неясной» (выделено нами). В конечном счете, ВИЧ-эксперты, включая Галло, показали, что для выявления вирусного генома частицы вируса должны быть очищены.

http://theperthgroup.com/OTHER/ENVCommentary.pdf#page=37

Познавательные статьи:



Где возникла философия и почему?

Относительная высота сжатой зоны бетона

Сущность проекции Гаусса-Крюгера и использование ее в геодезии

Тарифы на перевозку пассажиров