Серологические реакции в диагностике паразитарных заболеваний.

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 71 из 108Следующая ⇒

Б) Дополнительные методы

Наряду с нативными препаратами имеется ряд дополнительных методов диагностики кишечных паразитов. К наиболее распространенным из них относятся методы обогащения для обнаружения яиц, личинок и цист, а также методы постоянного окрашивания препаратов для выявления трофозоитов и цист.

При использовании последних можно обнаружить яйца и личинки гельминтов и цисты простейших, однако нельзя увидеть трофозоиты простейших, поскольку они разрушаются в процессе обогащения. Поэтому исследование нативных препаратов является обязательным начальным этапом микроскопического исследования.

Использование методов обогащения показано в тех случаях, когда исследование нативных препаратов дает отрицательные результаты.

В качестве способа обогащения рекомендуется формалин-эфирный (или формалин-этилацетатный) метод. Посредством последнего можно обнаружить все типы яиц гельминтов (нематод, цестод и трематод), личинки, а также цисты простейших.

2. Перианальный соскоб на энтеробиоз

Анальные тампоны используются для обнаружения остриц, а также яиц тениид. Энтеробиоз встречается чаще у детей, чем у взрослых. Однако чаще всего, если острицы обнаруживаются хотя бы у одного ребенка в семье, все остальные члены семьи также оказываются инвазированными. Поэтому если у ребенка обнаружены острицы, необходимо подвергнуть обследованию всех членов семьи, особенно детей. Яйца остриц обычно находят в кожных складках перианальной области. Они редко встречаются в фекалиях.

3. Пробы мочи

Пробы мочи обычно исследуют на наличие возбудителей мочеполового шистосомоза. В них также можно наблюдать трофозоиты возбудителей мочеполового трихомоноза.

Иногда после центрифугирования мочи больных из эндемичных по филяриндозам стран, особенно при хилурии, в осадке можно обнаружить микрофилярий возбудителей вухерериоза и онхоцеркоза.

В эндемичных по шистосомозам странах первым косвенным указанием на наличие инвазии является гематурия и/или протеинурия, выявляемые посредством диагностических полосок. Макрогематурия указывает на интенсивную инвазию.

Для обнаружения яиц шистосом используются два метода — осаждение и фильтрация. Осаждение — менее чувствительный, но более дешевый и простой в выполнении метод. Фильтрация применяется в медицинских учреждениях в тех случаях, когда требуется получить количественную оценку интенсивности инвазии.

4. Выделения из влагалища и мочеиспускательного канала

Влагалищные и уретральные выделения исследуют на наличие Trichomonas vaginalis — жгутикового паразита мочеполовой системы. Он паразитирует как у мужчин, так и у женщин, однако у мужчин инвазия обычно протекает бессимптомно. Возбудителя обычно обнаруживают в нативных препаратах, приготовленных из влагалищных и уретральных выделений. (В окрашенных препаратах эти паразиты сильно деформируются и не всегда могут быть идентифицированы.)

В нативных препаратах жгутиковые могут быть идентифицированы по характеру их движения. Трофозоиты трихомонад передвигаются нервными, дергающими или прыгающими движениями. Поскольку Т. vaginalis является единственным видом трихомонад, обитающих в мочеполовой системе, нет необходимости изучать их морфологические признаки или дифференцировать их от кишечных трихомонад (Т.hominis), паразитирующих в кишечнике. В редких случаях за паразитов могут быть ошибочно приняты имеющие микроворсннки эпителиальные клетки половых путей.

5. Пробы крови и других биологических материалов

Кровь исследуют на наличие нижеперечисленных возбудителей паразитарных болезней:

— малярийных паразитов,

— микрофилярий,

— трипаносом,

— лейшманий.

Наиболее распространенным способом исследования крови является метод окрашенных препаратов крови. Для окрашивания препаратов крови обычно используется краска Гимзы (одна из разновидностей краски Романовского). Для окрашивания микрофилярий применяется гематоксилин Делафильда.

В зависимости от обстоятельств могут использоваться как толстые капли, так и тонкие мазки.

Исследование толстой капли является более чувствительным методом обнаружения паразитов, при этом сокращается также время на проведение исследования. В тонком мазке паразиты подвергаются лишь незначительной деформации, что позволяет установить их видовую принадлежность в тех случаях, когда это не удается сделать в толстой капле, но при этом может потребоваться исследовать намного больше полей зрения для обнаружения паразитов, если численность последних будет низкой. Поэтому при исследовании на малярийные паразиты и трипаносомы необходимо исследовать как толстые капли, так и тонкие мазки крови; при невозможности точной видовой диагностики по толстой капле это позволит установить вид паразита по тонкому мазку.

Для исследования на микрофилярий нужно использовать толстые капли.

Патогенные протисты имеют сложную антигенную структуру и содержат гораздо больший набор антигенов, чем бактерии. Организм больного человека реагирует на антигены протистов развитием разнообразных гуморальных и клеточных защитных реакций, но эффективность их при разных инвазиях неодинакова, что зависит от вида и локализации паразита в организме.

Так, при паразитемиях (развитие простейших в крови) вырабатывается большое количество паразитоцидных иммуноглобулинов, однако полной элиминации циркулирующих в крови простейших они не вызывают. Под их влиянием у части простейших быстро развивается изменчивость антигенной структуры. К таким паразитам, например, можно отнести африканские трипаносомы и малярийные плазмодии. Дизентерийные амебы, жиардии (лямблии), трихомонады – слабые иммуногены. В ответ на их воздействие организм продуцирует невысокий титр антител. Столь же ограничена индукция клеточных иммунных реакций.

Паразитирующие в спинномозговой жидкости и головном мозге простейшие и гельминты иммунологических реакций не вызывают. Более того, такая локализация защищает их от паразитоцидного действия иммуноглобулинов, фагоцитов и цитотоксических лимфоцитов.

При протозойных инвазиях и гельминтозах могут быть использованы все иммунологические реакции, но чаще всего, – реакция иммунофлюоресценции, реакция связывания комплемента, реакция непрямой гемагглютинации и иммуноферментный анализ, которые, однако, часто оказываются недостаточно специфичными вследствие медленного нарастания антипротозойных и антигельминтных иммуноглобулинов или низкого их титра. В отличие от этого при паразитарных болезнях в крови закономерно нарастает титр аллергических иммуноглобулинов.

Современная иммунология разработала большой комплекс простых и очень точных иммунологических реакций, широко используемых не только в диагностике инфекционных болезней и инвазий, но также при оценке иммунологической реактивности организма, аллергии, аутоиммунных и других иммунопатологических процессов.

Серологическими называют такие реакции, для постановки которых используют сыворотку (serum), содержащую антитела. В их основе лежит специфическое взаимодействие антитела с антигеном.

Серологические реакции применяют: а) для идентификации микроорганизмов, токсинов, любого антигена с помощью известных иммунных диагностических сывороток; б) для определения природы антител в сыворотке крови с помощью известных антигенов-диагностикумов. При этом метод определения видовой принадлежности (идентификация) микробов называют серологическим типажем, а способ определения титра антител в сыворотке крови – серологической диагностикой.

Основными серологическими реакциями являются традиционные реакции агглютинации, преципитации, лизиса, связывания комплемента, нейтрализации и различные их модификации.

Общие закономерности серологических реакций:

1. реакции ставятся in vitro;

2. проявляются при иммунологическом соответствии (гомологичности) антигена и антитела, в оптимальных температурных условиях и рН среды;

3. протекают в две фазы:

а) взаимодействие антигена с антителом – специфическая фаза;

б) образование комплекса антитело – антиген – неспецифическая фаза.

Иммунные диагностические сыворотки получают путем многократного введения животным в нарастающих дозах убитых или живых микроорганизмов (паразитов), продуктов их распада, обезвреженных или нативных токсинов.

Реакции с использованием меченых антител.Мечеными называются антитела, связанные с индифферентными для них веществами, которые, не изменяя их специфичности и антигенной структуры, придают иммуноглобулинам характерные свойства, что облегчает идентификацию антигенов в иммунных комплексах. Наибольшее распространение как получили реакции иммунофлюоресценции, иммуноферментный анализ, радиоиммунный анализ.

Познавательные статьи:



Психологические особенности спортивного соревнования

Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации

Занятость населения и рынок труда

Социальный статус семьи и её типология