Твердофазный иммуноферментный анализ

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 9 из 108Следующая ⇒

▷ Похожие статьи

Твердофазный иммуноферментный анализ – один из самых многофункциональных серологических методов диагностики инфекционных заболеваний, который применяют для определения с равной эффективностью как антигенов, так и антител. Принцип метода показан на рис. 1.18. Он основан на связывании антигена антителами, иммобилизованными на поверхности пластиковой лунки. Связавшийся антиген затем определяют с помощью второго антитела. Комплекс антитело-антиген-антитело затем определяют с помощью антииммуноглобулина, меченого ферментом. Существует множество вариантов этой схемы.

Главное преимущество метода – усиление, так как каждое антитело с ферментной меткой способно реагировать со многими молекулами субстрата с образованием окрашенного продукта. Это дешевый и надежный метод, который может найти разнообразное применение. Главный недостаток твердофазного иммуноферментного анализа – в том, что реакции происходят в жидкой фазе, и, следовательно, требуется аккуратно отмеривать растворы. Перекрестная контаминация между лунками может иметь катастрофические последствия. По этим причинам твердофазный иммуноферментный анализ выполняется только в специализированных лабораториях опытными специалистами. Созданы тест-системы для практического использования (так называемые CITE тесты). В большинстве случаев твердая лунка заменена специальной мембраной. Так как реакция происходит в жидкой фазе, важно следить за тем, чтобы мембрана не высыхала.

Иммуноиммиграционный экспресс-анализ

Иммуноиммиграционный экспресс-анализ (рис. 1.19) имеет много общего с твердофазным иммуноферментным анализом и CITE. Доказано, что этот метод подходит для использования на практике; в настоящее время он очень популярен для диагностики многих вирусных инфекций или для определения серологической конверсии, вызванной возбудителем. Метод основан на связывании частиц коллоидного золота или латекса, покрытых антителами, с вирусными белками или сывороточными антителами (рис. 1.19). Комплекс диффундирует вдоль мембраны, пока не достигнет полосы специфичных антител к определяемому белку. Комплекс коллоид-белок-антитело образует агрегаты вдоль этой линии, что приводит к изменению цвета полосы. Имеется также контрольная полоса, показывающая, что тест проведен правильно и комплексы коллоид-белок-антитело диффундировали достаточно далеко (рис. 1.19). Если контрольная полоса не появилась, тест недействителен. В таком случае образец нужно послать в лабораторию для дальнейшего исследования.

Подпись к рисунку.

Рис. 1.19: пример иммуноиммиграционного экспресс-теста

Рис. 1.20: Принцип иммуноиммиграционного экспресс-метода

ЛИТЕРАТУРА И ДАЛЬНЕЙШЕЕ ЧТЕНИЕ

Глава 2

Антимикробная и антипаразитарная терапия

Джонатан Эллиот

ПЛАН.

Введение

    Механизм действия

    Избирательная токсичность

    Гибель микроорганизмов или торможение их роста

    Синергические и антагонистические реакции

    Резистентность

Антибактериальные препараты

    Спектр действия

    Определение чувствительности микроорганизмов

    Сочетания препаратов

    Фармакокинетика

    Метод введения и скорость всасывания

    Распределение в области инфекции

    Выведение из организма

    Правила дозирования

    Ингибиторы действия антибактериальных препаратов

Побочное действие

    Устранение побочных эффектов:

    Обсуждение фармакодинамики

    Отбор в сторону устойчивости в бактериальной популяции

Антивирусные препараты

    Ацикловир

    Трифлуридин

Препараты против ретровирусов

    Цидовудин

    Другие препараты против ретровирусов

Антигрибковые препараты

    Терапевтическая классификация антигрибковых препаратов

    Антигрибковые препараты при систематическом применении

Антипаразитарные препараты

    Эндопаразитоциды

    Спектр действия и фармакокинетика

       Токсичность

Эктопаразитоциды

       Спектр действия и фармакокинетика

       Нежелательные эффекты

Антипротозойные препараты

_________________________________________________________________________________

ВВЕДЕНИЕ.

Антимикробные и антипаразитарные препараты настолько широко используются для лечения мелких домашних животных, что кажется, их можно применять бесконтрольно. Логический подход к выбору этих важных препаратов необходим по двум причинам:

· Большое разнообразие в продаже антимикробных и антипаразитарных препаратов для лечения мелких животных затрудняет выбор

· Назначение препаратов ветеринарными врачами необходимо тщательно контролировать, иначе возможно развитие резистентности к антибиотикам у возбудителей заболеваний человека.

Подходящий препарат подбирают с учетом условий, которые можно разделить на три группы:

· Патоген

- Вызваны ли клинические проявления микроорганизмом?

- Какие патогены могут вызвать процесс?

- Какова чувствительность патогена к антибиотикам?

· Хозяин

- Каковы естественные защитные силы организма хозяина против патогена?

- Какие барьеры в организме хозяина могут помешать препарату достичь патогена?

- Какова будет реакция на препарат со стороны ослабленного организма хозяина?

· Препарат

- Каково действие препарата на патоген?

- Какая доза потребуется, и каким курсом нужно давать препарат?

- Каково побочное действие препарата на организм хозяина?

Отношения между хозяином, патогеном и препаратом можно изобразить в виде «терапевтического треугольника» (рис. 2.1.)

Рис. 2.1: терапевтический треугольник

Механизм действия

Понимание механизма действия антимикробных и антипаразитарных препаратов помогает объяснить их важные клинические свойства. Механизмы действия основных групп этих препаратов представлены на рисунках 2.2–2.4. Зная механизм действия препарата, можно прогнозировать:

· Степень избирательной токсичности, достигаемая при его применении

· Действие на патоген (-«цидное» или –«статическое»)

· Будет ли препарат взаимодействовать с другими как синергетик, антагонист, или дополнять их действие

· Развивается ли резистентность

Избирательная токсичность.

Избирательная токсичность является целью антимикробной и антипаразитарной терапии и основана на использовании различий между микроорганизмом и организмом млекопитающего во время лечения. Препарат обладает полной избирательной токсичностью, если при концентрации в тканях хозяина он повреждает патоген, но оставляет незатронутыми клетки организма. Чем меньше физиологических связей между возбудителями и организмом хозяина, тем труднее достичь полной избирательности. Например, вирусы используют многие ферменты хозяина для собственной репликации, и, следовательно, найти способ остановить их репликацию без повреждения клеток хозяина очень сложно.

Познавательные статьи:



Организация работы процедурного кабинета

Статус республик в составе РФ

Понятие финансов, их функции и особенности

Сущность демографической политии