Методики концентрации микрофилярий

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 7 из 108Следующая ⇒

Существует несколько методов концентрирования кровепаразитов. Наиболее широко используется модифицированный метод Кнотта (рис. 1.14).

Кроме того, есть готовые тест-системы для концентрирования методом фильтрации. Отрицательные результаты, полученные данным методом, недостоверны; примерно у 25% собак, зараженных сердечными гельминтами, микрофилярии в крови отсутствуют.

Рис. 1.12: Приготовление мазка крови. На фото показана Haemobartonella canis в мазке крови

Рис. 1.13: Окраска акридиновым оранжевым для определения Haemobartonella felis. Пример показан на рисунке 5.8а.

Рис. 1.14: Модифицированный способ Кнотта. На фотографии показана микрофилярия Dirofilaria immitis. Этот паразит слабо отличается от безвредной миркрофилярии Dipetalonema reconditum, для постановки диагноза может потребоваться консультация эксперта. (с любезного разрешения д-ра Сюзан Шоу).

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ.

Диагностика инфекционных болезней методом определения специфических антител стала общепринятой практикой, особенно если постановка диагноза другими способами затруднительна или дорогая. Серология широко используется при популяционных исследованиях, в некоторых программах скрининга и при тестировании вакцин.

Серологические методы имеют некоторые недостатки:

· Присутствие антител не всегда является показателем активной инфекции, а может отражать ранее перенесенные заболевания

· Антитела могут вырабатываться на непатогенный организм, родственный патогенному

· Выработка антител занимает некоторое время, следовательно, серологические тесты менее эффективны при острых инфекционных заболеваниях

· При серологическом исследовании парных образцов концентрация антител может достичь максимума к моменту появления клинических признаков

· Титры антител могут оставаться низкими у животных с ослабленным иммунитетом.

Большинство этих факторов создают впечатление, что значимость серологической конверсии превышает значимость клинических проявлений. Клиницисты никогда не должны путать серологическую конверсию с демонстрацией возбудителя.

Важно, чтобы в серологических методах использовались белки-мишени, характерные для исследуемого заболевания. Например, при диагностике возбудителя заболевания сельскохозяйственных животных и человека, но имеющего также штаммы, патогенные для мелких животных, можно с большой вероятностью получить ложноотрицательный результат. В равной степени, присутствие материнских антител может привести к ложноположительному результату. К тому же нужно помнить, что изменение условий теста может дать ложноположительный или ложноотрицательный результат независимо от наличия или отсутствия антител. Это может произойти либо из-за неспособности антител связывать антиген, либо в результате неспецифической реакции антител с антигеном.

Парные образцы.

За классический показатель активной инфекции в организме принимается 4-кратное увеличение титра антител. К сожалению, отобрать пробу в начальный период болезни часто бывает невозможно. И даже если это возможно, некоторые заболевания, например, парвовирусный энтерит, характеризуются настолько быстрым подъемом уровня антител, что титр будет максимальным уже в первой пробе. Кроме того, при заражении вирусами, подавляющими иммунную систему (например, вирус чумы плотоядных), увеличения титра может не быть вовсе. Вероятно, определение специфических IgM в будущем заменит метод парных образцов.

Классы антител.

На данный момент существует несколько тест-систем, определяющих только IgM, образующиеся в ответ на определенные патогены, например, Т oxoplasma gondii. Обычно IgM не остаются после выздоровления, и, следовательно, их высокий титр является показателем недавнего заражения. Длительность персистирования IgM может варьировать в зависимости от индивидуальных особенностей животного и природы антигена. Например, у кошек время персистирования антител класса IgM к Т oxoplasma gondii обычносоставляет около 6 недель, но иногда может длиться до 6 месяцев. Определение титра IgM может вызывать затруднения; проблемой являются перекрестные реакции с IgG.

Познавательные статьи:



Техника нижней прямой подачи мяча

Комплекс физических упражнений для развития мышц плечевого пояса

Стандарт Порядок надевания противочумного костюма

Общеразвивающие упражнения без предметов