Приготовление питательной среды Мурасиге и Скуга (МС).

↑

⇐ ПредыдущаяСтр 9 из 12Следующая ⇒

Для приготовления 1 л среды Мурасиге-Скуга (МС) необходимо взять:

Ø Макросоли МС - 100 мл (каждого маточного раствора);

Ø Микросоли МС - 1 мл (каждого маточного раствора);

Ø Fe-хелат - 5 мл;

Ø Мезоинозит - 100 мг;

Ø В1 - 1 мг (1 мл маточного раствора);

Ø В6 - 1 мг (1 мл маточного раствора);

Ø РР - 0,5 мг (0,5 мл маточного раствора);

Ø Сахароза - 30 г;

Ø Агар-агар - 7 г.

Таблица 1. - Состав питательной среды Мурасиге-Скуга (МС) для культивирования растений in vitro

Компоненты среды

Количество на 1 л

Среда для асептических проростков

Среда для индукции первичного каллюсогенеза

Маточные растворы макросолей

100 мл

100 мл

Маточные растворы микросолей

1 мл

1 мл

Fe-хелат

5 мл

5 мл

Витамины: РР

0,5 мг

0,5 мг

В1

1 мг

1 мг

В6

1 мг

1 мг

Мезоинозит

100 мг

100 мг

ФГ: НУК

-

2 мг

ИУК

-

2 мг

2,4-Д

-

2 мг

Кинетин

-

1 мг

БАП

-

1 мг

Сахароза

30 г

30 г

Агар-агар

7 г

7 г

«Продолжение» - таблицы 1.

Ход работы:

Ø колбу или стакан объёмом 1л поместить на магнитную мешалку, налить 50-100 мл дистиллированной воды и добавить необходимый объем макро- и микросолей, Fe-хелата, витаминов и фитогормонов (если входят в состав среды);

Ø взвесить необходимое количество мезоинозита, сахарозы. Каждую навеску растворить в отдельной порции воды и добавить к смеси;

Ø довести рН до 6,6-6,8 с помощью раствора 1н КОН или раствора 1н HCl;

Ø навеску агара поместить в термостойкую колбу или стакан, залить холодной водой (50-100 мл), оставить на 20 минут для набухания и нагреть, постоянно помешивая до полного растворения агара;

Ø добавить растворенный агар-агар к раствору среды МС и довести до нужного объема (1 л) дистиллированной водой. Среду подогреть до полного растворения всех компонентов;

Ø разлить теплую среду в колбы или пробирки и закрыть ватными пробками или фольгой. Объём среды в колбе для автоклавирования не должен превышать 1/2 - 2/3 объема колбы;

Ø простерилизовать среду в автоклаве при давлении 0,8 - 1 атм (температура 115 - 120 ºС) в течение 20 - 30 минут [7 c.14-18].

Познавательные статьи:



Техника прыжка в длину с разбега

Организация работы процедурного кабинета

Области применения синхронных машин

Оптимизация по Винеру и Калману