Введение растительных объектов в культуру in vitro

↑

⇐ ПредыдущаяСтр 7 из 12Следующая ⇒

ГЛАВА 3

ИНДИВИДУАЛЬНОЕ ЗАДАНИЕ

Метод микроклонального размножения играет важную роль для ускоренного клонирования плодовых, ягодных, клубнеплодных, декоративных видов растений и древесных пород. Для некоторых видов (особенно декоративных) клональное микроразмножение in vitro используется для непосредственной реализации их на рынке. У других видов этот метод применяется для создания элитного и суперэлитного материала. В настоящее время число таких видов превышает 1000. И тем не менее следует отметить, что основной проблемой при широком использовании метода микроклонального размножения для некоторых видов растений остается высокая стоимость полученных клонов [2].

Процесс микроразмножения состоит из ряда последовательных операций, каждая из которых имеет свою специфику.

Этапы клонального микроразмножения:

Ø отбор подходящих эксплантов, их стерилизация и перенос на питательную среду;

Ø собственно микроразмножение;

Ø укоренение побегов с последующей адаптацией их к почвенным условиям;

Ø выращивание растений в условиях теплицы и подготовка их к посадке в поле.

I этап. При выборе экспланта необходимо учитывать как вид растения, так и метод микроразмножения, который будет использоваться. На процесс получения микроклонов влияет сезон года и фаза развития родительского растения, реакция экспланта во многом зависит от того, из какого органа растения он взят. Хотя большинство растений хорошо поддаются введению в культуру в фазе активного роста, экспланты некоторых растений образуют побеги лишь в фазе покоя. Из эксплантов чешуек луковиц лилии легко получить регенерацию деток, если их взять весной или осенью, а не в летний или зимний период. Апикальная меристема гвоздики, изолированная в марте, дает наибольший процент жизнеспособных растений. Чем меньше абсолютный возраст растений, тем интенсивнее идет рост побегов. Эта зависимость особенно ярко выражена у древесных растений.

Говоря об изолировании экспланта и его стерилизации нельзя обойти вопрос специальной подготовки родительских растений – доноров экспланта, что оказывает влияние на успех стерилизации.

Для получения стерильной культуры розеточного растения рудбекии его целесообразно с короткого дня на несколько дней перенести в условия длинного дня для вытягивания стебля. Это приводит к образованию розетки листьев целиком над землей на 23 стеблевых частях растений. В этом случае применение обычных стерилизующих растворов дает хорошие результаты.

Химический состав питательной среды, ее физические свойства должны соответствовать тем задачам, которые выполняет среда на каждом этапе микроразмножения. На первом этапе в состав питательной среды часто вводят антиоксиданты (цистеин, глутатион, аскорбиновая кислота), которые предупреждают действие гидролитических ферментов и гибель высаженных эксплантов. Мейер предлагает все операции по изолированию экспланта проводить на фильтровальной бумаге, пропитанной аскорбиновой кислотой, а во время подготовки эксплантов и в процессе их пересадок погружать ткани в раствор, содержащий антиоксиданты.

 1 - растения розы; 2-3 - черенкование; 4 - терилизация эксплантов; 5 - образование побегов; 6 - ризогенез микрорастений; 7 - высадка микрорастений в горшочки; 8 - поддержание высокой влажности для укоренения и выживания
микрорастений в теплице

Познавательные статьи:



Техника прыжка в длину с разбега

Организация работы процедурного кабинета

Области применения синхронных машин

Оптимизация по Винеру и Калману