Лабораторная диагностика: методы диагностики вирусных инфекций.
20.Лабораторная диагностика: методы диагностики вирусных инфекций.
1. Вирусоскопический метод – делаем мазок, окрашиваем по Романовскому-Гимзе, ищем включения в клетке.
2. Вирусологический метод – выделение вируса из исследуемого материала и его идентификация
3. Серологический – определение нарастания титра антител, используются парные сыворотки
4. Молекулярно-биологический – обнаружение в материале фрагментов нуклеиновых кислот вируса
21.Лабораторная диагностика полиомиелита – серологический метод, особенности.
Серологическая диагностика основана на использовании парных сывороток больных с применением эталонных штаммов вируса в качестве диагностикума. Проводят РН, РСК и РТГА. Определяют нарастание титра АТ для взрослых в 4 раза, для детей – в 2.
РН. Компоненты: сыворотка больного и диагностикум. Готовят разведения сывороток, добавляют диагностикум, заражают смесью культуру клеток. Пол. результат: отсутствие ЦПД вируса, бляшкообразования и изменения цвета.
РСК: Компоненты: 1 система – сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система – гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат – отсутствие гемолиза.
РТГА: Компоненты: сыворотка больного, диагностикум, ИХН. Готовят разведения сыворотки, добавляют диагностикум. Инкубируют 37С 30-60 мин. Добавляют взвесь эритроцитов. Инкубируют 30-45 мин. Пол. результат: образование пуговки, т.е. отсутствие агглютинации.
Содержание сывороточных иммуноглобулинов классов IgG, IgA, IgM определяют методом радиальной иммунодиффузии по Манчини. Метод основан на реакции образования нерастворимого комплекса (преципитата) выявляемого белка со специфическими антителами в тонком слое агара. Преципитат имеет форму визуально видимого кольца.
|
