Дослід 2. Визначення ліпопротеїнів низької щільності (ЛПНЩ).

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 4 из 7Следующая ⇒

Принцип методу. Метод полягає у здатності ЛПНЩ осаджуватись в присутності СаCl₂ і гепарину, спричиняючи мутність розчину, ступінь якої пропорційна вмісту ЛПНЩ.

Матеріальне забезпечення: сироватка крові; 0,025 М розчин кальцію хлориду; піпетки; мікропіпетки.

Хід роботи. У пробірку наливають 2 мл 0,025 М розчину кальцію хлориду, додають 0,2 мл сироватки крові, ретельно перемішують і вимірюють оптичну густину (Е₁) на ФЕКу при довжині хвилі 630 – 690 нм (червоний світлофільтр) в кюветі товщиною 0,5 см проти дистильованої води. Розчин з кювети переливають у пробірку, доливають мікропіпеткою 0,04 мл 1 % розчину гепарину, перемішують і рівно через 4 хв. визначають оптичну густину розчину (Е₂) за аналогічних умов.

Різниця (Е₁ – Е₂) відповідає оптичній густині, зумовленій наявністю ЛПНЩ.

Розрахунок проводять за формулою:

Х = (Е₁ – Е₂) × 100

Вміст ЛПНЩ виражають в одиницях оптичної густини перемножених на розведення (100). В нормі вміст ЛПНЩ складає 35 – 55 ум.од.

Пояснити отриманий результат. Зробити висновок.

Клініко-діагностичне значення. ЛПНЩ синтезуються в печінці і становлять близько 5% білків плазми крові. У ліпідній частині ЛПНЩ переважають стерини і стериди: холестерол та його ефіри – 45 %, фосфоліпіди – 25 %, тригліцериди – 10 %. Високий вміст холестеролу та невеликий розмір молекули сприяють їх інфільтрації в інтиму аорти, що зумовлює розвиток атеросклерозу. У зв'язку з цим цю фракцію ліпопротеїнів називають атерогенними ліпопротеїнами.

За умов норми вміст ЛПНЩ і ЛПВЩ становить 3,6 та 2,6 г/л, відповідно. Співвідношення між ЛПНЩ і ЛПВЩ в організмі має важливе значення. Підвищення концентрації ЛПНЩ спостерігають при атеросклерозі, механічній жовтяниці, гепатитах, діабеті, ожирінні тощо.

Контроль виконання лабораторної роботи

1. Якою якісною реакцією можна виявити жовчні кислоти в біологічних рідинах?

A. Проба Ланге

B. Біуретова реакція

C. Реакція Петенкофера

D. Бензидинова проба

E. Реакція Фоля

2. Яке значення жовчних кислот у травленні та засвоєнні ліпідів?

A. Проводять гідроліз ліпідів

B. Емульгують жири, пришвидшують їх травлення та всмоктування

C. Транспортують моносахариди

D. Запобігають розщепленню білків

E. Проводять виведення жирів з організму

3. Вміст холестеролу в крові становить 12 ммоль/л. Дати клінічну інтерпретацію результату, вказати можливі причини і наслідки для організму.

4. Під час аналізу крові виявлено високий вміст холестеролу у фракції ЛПНЩ (β-ліпопротеїнів). Назвіть причини та можливі наслідки для організму.

Приклади тестів „Крок-1”

1. При обстеженні хворого виявлено підвищений вміст ліпопротеїнів низької щільності в сироватці крові. Яке захворювання можна очікувати у цього хворого?

A. Запалення легенів

B. Атеросклероз

C. Гастрит

D. Гострий панкреатит

E. Ураження нирок

2. Скарги та об’єктивні дані дозволяють припустити наявність у хворого запального процесу у жовчному міхурі, порушення колоїдних властивостей жовчі, ймовірність утворення жовчних каменів. Що головним чином може спричинити їх утворення?

A. Урати

B. Оксалати

C. Хлориди

D. Фосфати

E. Холестерол

Література

Основна:

1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – 508 с.

2. Гонський Я.І., Максимчук Т.П. Біохімія людини. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – 744 с.

3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – 743 с.

4. Клінічна біохімія / За ред. Склярова О.Я. – Київ: Медицина, 2006. – 4 32 с.

5. Біохімічні показники в нормі і при патології / За ред. О.Я. Склярова – К.: Медицина, 2007. – 320 с.

6. Біологічна хімія. Тести та ситуаційні задачі. / За ред. О.Я. Склярова. – Львів: Світ, 2006. – 271 с.

Додаткова:

1. Кольман Я., Рем К.-Г. Наглядная биохимия. – М.: Мир, 2000. – 469 с.

2. Малюкова Н. Г. Возрастные особенности состояния перекисного окисления липидов и активности антиоксидантной системы при хронической сердечной недостаточности // Проблемы старения и долголетия. – Т. 14, № 2. – 2005. – С. 143 – 150.

Змістовий модуль 11. Метаболізм амінокислот.

Познавательные статьи:



Психологические особенности спортивного соревнования

Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации

Занятость населения и рынок труда

Социальный статус семьи и её типология