Исследование химической денатурации белков

↑

▷ Содержание

Стр 1 из 37Следующая ⇒

Проведение анализа

Берут 2 ряда пронумерованных пробирок, помещая каждый ряд в отдельный штатив. В 1-й ряд пронумерованных пробирок вносят по 5 капель 1 % раствора яичного белка, во 2-й ряд ‑ по 5 капель сыворотки крови. В каждый ряд пробирок добавляют реактивы, пользуясь указаниями приведённой ниже таблицы. После проведения всех реакций оценивают результаты, сравнивают с изменениями в соседних пробирках. Затем для всех пробирок устанавливают необратимость/обратимость осаждения белка, добавляя к осадку 10‑20 капель дистиллированной воды, результат сравнивают с изменениями в соседних пробирках.

Практическое значение

Реакции химической денатурации используют для осаждения белка в биоматериале с целью дальнейшего определения в надосадке низкомолекулярных веществ (чаще всего веществ углеводной и липидной природы); выявления или оценки содержания белка в биологических жидкостях; связывания солей тяжелых металлов при лечении отравлений и для профилактики их на производстве; обезвреживания отходов в санитарной практике; дезинфекции кожи, слизистых покровов.

Оформление работы

Регистрируют результаты работы в виде таблицы, оценивая по выпадающему осадку интенсивность денатурации белков: – отсутствие; + слабая; ++ сильная; +++ очень сильная. В конце таблицы делают общий вывод по химической денатурации белка, особенностям действия отдельных денатурирующих агентов и обратимости химической денатурации белков.

Вопросы для самоконтроля

1) Основные физико-химические свойства белковых молекул.

2) Основные типы структур и уровни организации белковых молекул.

3) Методы очистки белков. Анализ первичной структуры и состава белковых молекул.

4) Свойства белковых растворов, факторы стабилизации белков в растворе.

5) Пути выделения белковых веществ, способы осаждения и удаления белка из растворов.

6) Денатурация белковых молекул, типы денатурации, условия обратимости.

7) Виды денатурирующих агентов, механизмы действия на молекулы белков.

8) Ренативация белков. Фолдинг и рефолдинг. Шапероны, их виды и свойства.

ТЕМА 1.3.
Классификация, функции белков.
Простые и сложные белки

Актуальность

Белки выполняют разнообразные специфические функции в организме ‑ транспорт кислорода и других соединений, хранение и передача наследственной информации и т.д. Особенности строения белковых макромолекул и их изменения лежат в основе развития ряда патологических процессов. Изучение их структуры необходимо для понимания роли белков организме и характера нарушений при некоторых заболеваниях (серповидноклеточная анемия, наследственные нарушения биосинтеза белков и др.) Реакции открытия белковой и простетической групп позволяют понять состав и строение сложных белков, а также использовать эти данные для реакций количественного определения.

Цель

1) Научиться выделять сложные белки из различных объектов и проводить качественные реакции на компоненты сложных белков.

2) Изучить структуру и свойства сложных белков: фосфо‑, глико‑, флавопротеинов и других.

Вопросы для самоподготовки

1) Строение протеиногенных аминокислот, свойства боковых радикалов аминокислот в составе молекул белков, взаимодействие с небелковой частью.

2) Классификация белков по функциональным признакам, основные представители классов.

3) Классификации белков по строению.

4) Простые белки. Характеристика, особенности строения и функции классов простых белков (протамины, гистоны, альбумины, глобулины и др.).

5) Общая характеристика, особенности строения сложных белков.

6) Фосфопротеины: строение и узел связи с небелковой частью, функции.

7) Хромопротеины. Разнообразие небелковой части (гемо‑, флаво‑, ретиналь‑ протеины и др.), функции, основные представители. Понятие о строении витаминов В₂, А, гема, гемоглобина и миоглобина.

8) Металлопротеины: понятие о строении и связях, основные представители, роль в транспорте и депонировании металлов, металлоферменты.

9) Гликопротеины: строение, связь с небелковым компонентом, состав углеводного компонента, функции в организме. Сходство и различия гликопротеинов и протеогликанов.

10) Протеогликаны: функции, представление о строении простетической группы (углеводный кор, пример его построения и связи с белком, участие гликозиламиногликанов – хондроитинсульфат и др.).

11) Липопротеины. Понятие о строении, связях липопротеинов мембран. Структура транспортных липопротеинов, функции апобелков. Основные транспортные формы липидов плазмы – хиломикроны, липопротеины очень низкой, низкой и высокой плотности (ЛПОНП, ЛПНП и ЛПВП).

12) Понятие о надмолекулярных комплексах и их построении – на примере протеогликанов и транспортных липопротеинов

Познавательные статьи:



Техника прыжка в длину с разбега

Организация работы процедурного кабинета

Области применения синхронных машин

Оптимизация по Винеру и Калману