Метод наиболее вероятных чисел (НВЧ)
Метод НВЧ используют при испытании ЛС с низ- ким уровнем микробной контаминации, а также в тех случаях, когда нельзя применить другие методы. Ме- тод НВЧ менее чувствителен и точен по сравнению с чашечным агаровым методом или методом мембран- ной фильтрации. Метод используют только для опре- деления общего числа бактерий, так как результаты, полученные для определения общего числа грибов, особенно плесневых, считают недостоверными.
При выполнении испытания исследуемый обра- зец готовят в виде раствора, суспензии или эмульсии в разведениях 1:10, 1:100, 1:1000, используя подхо- дящий растворитель. Жидкую питательную среду разливают в 12 стерильных пробирок по 9 мл в каж- дую. Пробирки ставят в штатив в 4 ряда по 3 про- бирки.
В первый ряд пробирок вносят по 1 мл испыту- емого образца в разведении 1:10, во второй ряд — по 1 мл в разведении 1:100, в третий ряд — по 1 мл в разведении 1:1000. В пробирки четвертого ряда вно- сят по 1 мл разбавителя, который используют для рас- творения, суспендирования или эмульгирования об- разца. Посевы инкубируют в стандартных условиях в течение не более 3 сут.
После завершения испытания о тмечают число пробирок в первом, втором и третьем рядах, в которых визуально наблюдают рост микроорганизмов. Среда в пробирках четвертого ряда (контроль разбавителя) должна оставаться стерильной. Полученное трехзнач- ное число соответствует наиболее вероятному коли-
честву жизнеспособных микроорганизмов в 1,0 г или в 1,0 мл лекарственного средства (Таблица 51).
Наиболее вероятное число микроорганизмов (НВЧ)
Таблица 51.
Количество пробирок в каждом ряду, где наблюдают рост
зи с природой исследуемого препарата (помутнение среды, изменение ее цвета и т. п.), делают пересев на со- ответствующую жидкую или агаризованную среду, что- бы убедиться в наличии роста микроорганизмов.
Определение отдельных видов
Количество препарата в пробирке
в г (мл)
НВЧмикроорганизмов
в 1 г (мл) препарата
Микроорганизмов, недопустимых
И ограниченных количественно
0.1 0.01 0.001
| 0
| 0
| 0
| >3
| | 0
| 0
| 1
| 3
| | 0
| 1
| 0
| 3
| | 0
| 1
| 1
| 6.1
| | 0
| 2
| 0
| 6.2
| | 0
| 3
| 0
| 9.4
| | 1
| 0
| 0
| 3.6
| | 1
| 0
| 1
| 7.2
| | 1
| 0
| 2
| 11
| | 1
| 1
| 0
| 7.4
| | 1
| 1
| 1
| 11
| | 1
| 2
| 0
| 11
| | 1
| 2
| 1
| 15
| | 1
| 3
| 0
| 16
| | 2
| 0
| 0
| 9.2
| | 2
| 0
| 1
| 14
| | 2
| 0
| 2
| 20
| | 2
| 1
| 0
| 15
| | 2
| 1
| 1
| 20
| | 2
| 1
| 2
| 27
| | 2
| 2
| 0
| 21
| | 2
| 2
| 1
| 28
| | 2
| 2
| 2
| 35
| | 2
| 3
| 0
| 29
| | 2
| 3
| 1
| 36
| | 3
| 0
| 0
| 23
| | 3
| 0
| 1
| 38
| | 3
| 0
| 2
| 64
| | 3
| 1
| 0
| 43
| | 3
| 1
| 1
| 75
| | 3
| 1
| 2
| 120
| | 3
| 1
| 3
| 160
| | 3
| 2
| 0
| 93
| | 3
| 2
| 1
| 150
| | 3
| 2
| 2
| 210
| | 3
| 2
| 3
| 290
| | 3
| 3
| 0
| 240
| | 3
| 3
| 1
| 460
| | 3
| 3
| 2
| 1100
| 3 3 3 >1100
Пример. В первом ряду рост микроорганизмов на- блюдается в трех пробирках, во втором ряду — в двух пробирках, в третьем ряду — в одной пробирке. Полу- ченное число «321» по таблице 5 соответствует цифре
«150».
Следовательно, наиболее вероятное число бакте- рий в 1 г или 1 мл исследуемого образца — 150. Если учет результатов не может быть определен точно в свя-
В лекарственных средствах
Испытание включает использование селектив- ных и диагностических питательных сред, описанных в ГФ XII изд [43, 44].
|
