Реакция агглютинации на стекле.
Содержание книги
- Приготовление окрашенного препарата для иммерсионной микроскопии
- Приготовление препаратов живых клеток микроорганизмов
- Морфология бактерий. Ультраструктура и химический состав бактериальной клетки. Сложные методы окраски.
- Окраска мазков методом Ожешки
- Структура актиномицет, спирохет, риккетсий, хламидий, микоплазм. Морфология грибов, простейших. Контрольная работа по темам № 1 – 3
- Изучение морфологии спирохет, выявляемых в препарате из зубного налета, окрашенном по бурри-гинса
- Физиология микроорганизмов. Питание, рост и размножение бактерий. Бактериологический метод исследования.
- Выделение чистой культуры кишечной палочки ( e . Coli ) из ее смеси со стафилококком.
- Физиология микроорганизмов. Дыхание бактерий. Выделение чистой культуры.
- Методы культивирования анаэробных бактерий.
- Особенности культивирования риккетсий, хламидий, микоплазм
- Накопление чистой культуры микробов
- Физиология микроорганизмов. Биохимия бактерий. Идентификация микроорганизмов.
- Ферменты и их роль в жизнедеятельности бактерий
- Идентификация выделенной чистой культуры бактерий по биохимическим свойствам
- Структура вирусов, их репродукция и культивирование. Вирусологический метод исследования. Вирусы бактерий (бактериофаги).
- Методы индикации бактериофагов
- Развивающийся куриный эмбрион
- Генетика микроорганизмов. Контрольная работа по темам № 4 – 8
- Постановка реакции гемагглютинации
- Микрофлора организма человека. Дисбактериоз. Микрофлора полости рта
- Состав нормальной микрофлоры тела человека
- Приготовление фиксированного препарата из зубного налета и окраска по Граму
- Микрофлора объектов окружающей среды. Влияние на микроорганизмы факторов внешней среды. Методы стерилизации и дезинфекции. Антибиотики.
- Методы и приемы стерилизации с использованием физических, химических, и биологических методов
- Методы контроля эффективности стерилизации
- Бактериологическая диагностика дисбактериоза толстого кишечника
- Определение микробного числа водопроводной воды
- Инфекция и инфекционный процесс. Патогенные свойства микроорганизмов. Биологический метод исследования
- Биологический метод микробиологической диагностики
- Инфекционные заболевания. Контрольная работа по темам № 9 – 12
- Формы течения инфекционного процесса
- Иммунитет: виды, механизмы. Неспецифические и специфические факторы защиты организма. Антигены микроорганизмов. Формы иммунного реагирования организма. Иммунологический метод исследования.
- Основные клетки иммунной системы
- Важным свойством IgG является их способность проходить через плаценту.
- Реакция агглютинации на стекле.
- Характеристика иммуноглобулинов разных классов
Похожие статьи вашей тематики
На обезжиренное предметное стекло пипеткой наносят каплю диагностической сыворотки (разведение сыворотки 1:10 - 1:20). Бактериологической петлей берут чистую культуру исследуемого микроорганизма с поверхности скошенного агара, переносят в каплю сыворотки и перемешивают. Результат реакции учитывают невооруженным глазом через 3 – 5 мин. При положительной реакции в капле сыворотки отмечают появление хлопьев (крупных или мелких), хорошо видимых на темном фоне при покачивании предметного стекла. В случае отрицательной реакции жидкость остается равномерно мутной.
Реакция агглютинации в пробирках.
В ряд пробирок вносят по 1 мл физиологического раствора. В первую пробирку прибавляют равный объем исследуемой сыворотки крови. Готовят последовательные двукратные разведения сыворотки (титрование сыворотки), после чего в каждую пробирку вносят по 2 капли взвеси инактивированных бактерий (диагностикум). Пробирки помещают на 2 ч в термостат при 37°С.
Реакция протекает с образованием мелких хлопьев, невидимых невооруженным глазом, поэтому учет результатов проводят под небольшим увеличением в специальном приборе – агглютиноскопе. Интенсивность агглютинации учитывают по системе «четыре плюса»: полная агглютинация - 4+, частичная агглютинация - 3+ или 2+, сомнительный результат - +. За титр антител в исследуемой сыворотке принимают последнее разведение, в котором наблюдается агглютинация на 2+.
Реакцию агглютинации в пробирках (развернутая реакция агглютинации) проводят для определения титра антител к возбудителям брюшного тифа и паратифов (реакция Видаля), бруцеллеза (реакции Райта), сыпного тифа (реакция Вейгля).
Реакция преципитации (РП)
Реакцией преципитации называется осаждение из раствора АГ (преципитиногена) при воздействии на него иммунной сыворотки (преципитина) в растворе электролита. Осадок представляет собой макромолекулярный иммунный комплекс (преципитат).
Выпадение нерастворимого комплекса антиген-антитело в виде осадка наблюдается лишь при эквивалентных соотношениях ингредиентов – в зоне эквивалентности.
Зоной эквивалентности называется область, в которой все антитела количественно связаны с антигеном. При избытке антигенов или антител образовавшийся осадок растворяется.
В реакции преципитации принимают участие только растворимыеантигены (экстракты из микроорганизмов, органов и тканей, продукты распада клеток микроорганизмов - лизаты, фильтраты и т.д.). Антитела способные вызывать преципитацию антигена должны иметь не менее двух валентностей.
Преципитирующие сыворотки изготавливают путем гипериммунизации животных (кроликов).
Реакция кольцепреципитации.
В пробирку наливают 1,0 мл неразведенной преципитирующей сыворотки. Пипеткой медленно наслаивают по стенке пробирки (пробирку держат в наклонном положении) АГ в таком же объеме. Затем пробирку осторожно, чтобы не смешать жидкости, ставят вертикально. При правильном наслоении АГ на сыворотку четко видна граница между двумя слоями жидкости.
Результаты реакции учитывают через 1 – 2 минуты. В случае положительной реакции в опытной пробирке на границе между сывороткой и исследуемым экстрактом появляется преципитат в виде белого кольца.
С помощью РП можно выявить не только видовую, но и групповую специфичность белка. Например, определить степень родства различных видов животных и растений. В судебной медицине РП используется для определения видовой принадлежности белка (сыворотки крови). Применение РП для санитарно-гигиенического контроля пищевых продуктов позволяет выявить фальсификацию мясных, рыбных, мучных изделий, примеси в молоке и т.д.
Недостатками РП является нестойкость преципитата (кольца), который исчезает даже при легком встряхивании, а также невозможность установить количество разных АГ, участвующих в формировании преципитата.
Этих недостатков лишены реакции преципитации в геле. К ним относятся реакция иммунодиффузии по Оухтерлони, и реакция радиальной иммунодиффузии по Манчини.
|