Фаза развития бактериальной популяции

Вопрос 9. Методы выделения чистых культур аэробов:

1. Механическое разобщение клеток:

а) метод Коха: готовят десятикратные разведения материала в хлориде натрия, из каждого разведения 1 петлю вносят в пробирку с агаром (40⁰) и выливают его в чашку Петри;

б) метод Дригальского: 1 петлю материала наносят на поверхность агара в чашку Петри и растирают шпателем, затем, не прожигая его, растирают по поверхности агара второй, а затем третьей чашки и т.д;

в) механическое разобщение петлей;

г) количественный метод Голда: 1 мл жидкого или 1 г твердого материала вносят в 9 мл NaCl, затем 1 петлю материала наносят на чашку = делают 40 штрихов (сектор А), задевая штрихи сектора А, проводят 4 штриха (1-й сектор), аналогично засевают 2-й и 3-й секторы

2. Предварительная обработка материала с помощью физических или химических факторов.

Например: 1) неспорообразующие бактерии уничтожают прогреванием при 80 ⁰С 20 мин, споры при этом сохраняются;

2) для выделения микобактерий материал обрабатывают кислотой, при этом сопутствующая флора погибает

3. Избирательное подавление сопутствующих бактерий физическими или химическими факторами во время инкубации посевов.

Например: для выделений иерсиний чумы посевы инкубируют при Т=5 ⁰

4.Заражение чувствительных животных = для выделения возбудителя чумы из трупов грызунов

5. Использование биологических свойств бактерий. Например: метод Шукевича для выделения протея (ползучий рост).