Схема экспериментального метода исследования

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 19 из 20Следующая ⇒

▷ Похожие статьи

ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ

СЕРОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА ИССЛЕДОВАНИЯ

Серологический (от лат. serum - сыворотка, logos – учение) метод исследования (СЛМИ) – метод, в основе которого лежит реакция специфического взаимодействия антигенов (Аг) и антител (Ат).

Используя этот метод, можно определить неизвестное Ат при взаимодействии с известным Аг, и наоборот.

Основные понятия.

Диагностическая сыворотка (известное Ат) – иммунная сыворотка, содержащая Ат известной специфичности в известном титре. Диагностические сыворотки получают путём иммунизации животных соответствующим Аг. В последнее время в этом качестве всё чаще используют моноклональные Ат.

Диагностикум (известный Аг) - взвесь в физрастворе известных микроорганизмов или извлечённых из них Аг. В качестве неспецифического диагностикума могут быть использованы перекрёстно реагирующие Аг.

Титр сыворотки – максимальное разведение сыворотки (или минимальное её количество), в котором обнаруживаются Ат.

Диагностический титр – разведение сыворотки, в котором реакция положительна только у больных и отрицательна у здоровых. Для одной инфекции диагностический титр каждой серологической реакции свой.

Парные сыворотки – сыворотки одного обследуемого, взятые с определённым интервалом для изучения динамики титра Ат. Первую сыворотку берут в начале заболевания, в острую стадию, вторую – при острых инфекциях – через 7–14 дней, при хронических инфекциях – через месяц.

Серонегативный период – стадия заболевания, в которой специфические Ат ещё не обнаруживаются, несмотря на наличие возбудителя («серологическое окно»).

Серопозитивный период – стадия заболевания, в которой специфические Ат обнаруживаются.

Сероконверсия – переход серонегативности в серопозитивность.

Задачи СЛМИ:

1) серодиагностика инфекционных заболеваний, основанная на обнаружении в сыворотке Ат; диагностическое значение имеют:

1) высокая специфичность определяется способностью Аг взаимодействовать только с гомологичными Ат. Самая низкая специфичность – у РА.

2) чувствительность – минимальное количество Аг или Ат, которое выявляет реакция; хотя чувствительность зависит от метода исследования: минимальная – у РА (выявляет 100 мг Ат в 1 л), максимальная – у ИФА и РИА (выявляют до 0,00001 мг Ат в 1 л). В целом чувствительность достаточно высокая, но не абсолютная (95–98% в самых чувствительных реакциях).

3) ранний метод исследования при выявлении Аг, как микробных (обычно в РИФ), так и опухолеассоциированных (обычно в ИФА).

4) возможность проведения ретроспективных эпидемиологических исследований на основании обнаружения Ат. Ат циркулируют в организме относительно долго после контакта организма с возбудителем. Это особенно важно при ретроспективной диагностике субклинических форм заболеваний.

5) быстрота получения результатов. Скорость получения результатовзависит от используемой реакции. Так, при постановке РА на стекле результат может быть получен через 5 минут, при постановке РПГА – через 2 часа, РСК, ИФА, РИА – через 4 часа, РП в геле – через 24 часа.

1) поздний метод исследования при выявлении Ат: при острых инфекционных заболеваниях обнаружение Ат часто бывает ретроспективным потому, что Ат обычно появляются не ранее 7 дня от начала заболевания, а к этому времени острое заболевание может закончиться.

2) наличие ложных результатов:

А. Ложноположительных (ЛПР): острых (сохраняются до 6 месяцев) или хронических (наблюдаются постоянно).

Причины ЛПР:

а) низкое качество используемой тест-системы, её недостаточная специфичность;

б) наличие сопутствующих заболеваний и состояний:

для острых ЛПР:

– изменение гормонального фона (во время менстуации, за 2 недели до родов, в течение 3 недель после родов);

– другие острые инфекции;

– изменения липидного обмена при отравлениях, приёме алкоголя, жирной пищи, некоторых лекарств;

– при обширных травмах (открытые переломы, сотрясение мозга);

– при инфаркте миокарда (лёгкого).

для хронических ЛПР:

– нарушение обмена веществ;

– другие хронические инфекции;

– аллергические и аутоиммунные заболевания;

– хронические интоксикации;

– злокачественные опухоли.

в) технические погрешности в работе лаборанта (перепутывание образцов).

Познавательные статьи:



Где возникла философия и почему?

Относительная высота сжатой зоны бетона

Сущность проекции Гаусса-Крюгера и использование ее в геодезии

Тарифы на перевозку пассажиров