Кровяно-капельная реакция Минкевича (РА)

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 9 из 17Следующая ⇒

Приложение 6

КРОВЯНО-КАПЕЛЬНАЯ РЕАКЦИЯ МИНКЕВИЧА (РА)

Принцип метода: основан на использовании для РА цельной крови без отделения кровяных клеток, но с их предварительным лизисом под влиянием дистиллированной воды.

На обезжиренное предметное стекло нанести каплю крови и каплю дистиллированной воды. В капле образовавшегося гемолизата эмульгировать каплю диагностикума. Покачивая стекло, учесть наступившую реакцию. Контролем служит физ. раствор с диагнустикумом.

При этом в опытной капле — на фоне красного гемолизата видны белые хлопья агглютината (сначала по периферии, затем — по всей капле). В контроле наблюдается общее помутнение.

Приложение 7

ПОСТАНОВКА РЕАКЦИИ НЕПРЯМОЙ (ПАССИВНОЙ) РЕАКЦИИ ГЕМАГЛЮТИНАЦИИ (РНГА ИЛИ РПГА)

Принцип РНГА основан на способности эритроцитов адсорбировать на своей поверхности микробные антигены. Сенсибилизированные таким образом эритроциты агглютинируются в присутствие гомологичной для антигена сыворотки с антителами. При этом реакция идёт между микробным антигеном и антителами, а эритроциты пассивно через них вовлекаются в этот процесс. Для постановки РНГА необходимы эритроциты, обработанные танином, на которых адсорбированы специфические антигены возбудителя. Антигенами в РНГА могут служить очищенные антигены соответствующих микробов, экстракты бактериальных взвесей, надосадочные жидкости формалиновых, спиртовых, гретых бактериальных вакцин, вирусов. Реакцию ставят в агглютинационных пробирках или в лунках иммунологического планшета.

СХЕМА ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИИ

Ингредиенты

Разведение сыворотки

Контроли антигена

1:10

1: 20

1: 40

1: 80

1: 160

1:320

1:640

1:2800

На спон-танную агглюти-нацию

На специфич- нось реакции

Физ. раствор, в мл

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

-

-

Испытуемая сыворотка в разведении 1:5 в мл, инактивированная 30мин при +56 C°

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

вылить

-

-

Эритроцитарный диагностикум, в мл

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

Контрольная положительная сыворотка

-

-

-

-

-

-

-

-

-

0.5

Контрольная отрицательн-ая сыворотка

-

-

-

-

-

-

-

-

0.5

-

Результат (пример)

++++

++++

++++

+++

++

+

-

-

++++

-

Результаты реакции учитывают через 2 часа инкубации при + 37Сº и вторично — через 24 часа стояния при комнатной температуре. Их оценка зависит от характера осадка эритроцитов.

+ + + +

Резко положительная реакция: эритроциты равномерно покрывают всю лунку планшета в виде разрыхлённого зонтика с неровными краями

+ + +

Положительная реакция: почти все эритроциты агглютинированы и покрывают дно, края неровные

+ +

Большинство эритроцитов не агглютинированы, осели на дно, изредка встречаются мелкие хлопья склеенных эритроцитов. Слабая РПГА

-

Скопление эритроцитов имеет вид маленького, довольно плотного диска (пуговка).

Титром сыворотки считают последнее её разведение, которое вызывает склеивание эритроцитов при полном или почти полном просветлении надосадочной жидкости (2 плюса).

Познавательные статьи:



Формы дистанционного обучения

Передача мяча двумя руками снизу

Значение правильной осанки для жизнедеятельности человека

Основные ошибки при выполнении передач мяча на месте