Механизм и этапы окраски по Граму

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 2 из 3Следующая ⇒

Дают следующее окрашивание

красное

голубое (синее)

фиолетовое

желто-коричневое

зеленое

фуксин основной, нейтральный красный, конго красный

метиленовый и толуидиновый синий

генцианвиолет, метиленовый фиолетовый

хризоидин,

везувин

бриллиантовый зеленый, малахитовый зеленый

Сложные способы окраски, при которых применяются два или более красителя, являются ценными методами, используемыми в микробиологической диагностике инфекционных болезней.

Механизм и этапы окраски по Граму

1. На фиксированный мазок нанести карболово-спиртовой раствор генцианового фиолетового. Через 1 минуту экспозиции перейти к п.2.

2. Нанести раствор Люголя на 1-2 мин (йод).

3. Обесцветить этиловым спиртом в течение 30-60 сек. до прекращения отхождения фиолетовых струек красителя.

4. Возможно дополнительно промыть мазок водой.

5. Докрасить водным раствором фуксина в течение 1-2 мин,

6. Промыть водой, высушить и микроскопировать.

Грамположительные бактерии окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, грамотрицательные - в красный.

Механизм и этапы окраски по Цилю-Нельсону

1. На фиксированный мазок нанести карболовый раствор фуксина и подогреть до появления паров в течение 3-5 мин.

2. Промыть мазок водой

3. Нанести 5% раствор серной кислоты на 1-2 мин для обесцвечивания.

4. Промыть мазок водой

5. Докрасить мазок водным раствором метиленового синего в течение 3-5 мин

6. Промыть водой, высушить и микроскопировать

Некислоустойчивые – обесцвечиваются и окрашиваются метиленовым синим в голубой цвет, а кислоустойчивые остаются окрашенными фуксином в красный.

Метод Бурри-Гинса используется для окраски капсульных бактерий и основан на том, что капсула не воспринимает красители. Капсулу выявляют негативным контрастированием фона по Бурри. Для этого черную тушь смешивают c культурой и высушивают. После этого проводят фиксацию в пламени горелки, окрашивают тела микробных клеток по Гинсу - водным фуксином в течение 1 минуты и промывают водой 5-10 секунд.

Окраска по Леффлеру. Способ метахроматического выявления волютиновых зерен у коринебактерий. Для окраски используют щелочной раствор метиленового синего, который наносят на 3 - 5 мин на фиксированный мазок, после чего смывают водой, мазок высушивают и микроскопируют. Протоплазма бактерий окрашивается в голубой цвет, волютиновые зерна - в темно-синий.

Окраска по Нейссеру. Метод выявления волютиновых зерен у коринебактерий. Фиксированный мазок 2 - 3 мин красят уксуснокислым синим, 10 - 30 секунд обрабатывают раствором Люголя, слегка промывают водой и докрашивают в течение 30 секунд раствором везувина, высушивают и микроскопируют. Бактерии окрашиваются в желтый цвет, волютин -в темно-синий.

Окраска риккетсий по Здродовскому. Тонкий мазок фиксируют на пламени горелки. Окраску производят разведенным карболовым фуксином в течение 5 минут. Окрашенный препарат промывают водой, а затем обесцвечивают в растворе 0,01% соляной кислоты в течение 2—3 секунд. Затем препарат промывают водой и докрашивают 0,5% раствором метиленовой сини в течение полминуты. В препарате на синем фоне будут видны окрашенные в красный цвет риккетсии.

Окраска по Романовскому—Гимзе. Краска Гимзы — смесь азура (органическая краска, получаемая из метиленового синего), эозина и метиленовой сини. Будучи в растворе синего цвета, она окрашивает клеточную цитоплазму в голубой цвет, а ядра клеток, зернистость, слизь, капсулы бактерий — в красно-фиолетовый цвет.

Окраска по Романовскому—Гимзе является одним из основных методов при изучении морфологии простейших, спирохет, а также при исследовании форменных элементов крови.

Способ применения. К 10 мл дистиллированной воды перед окрашиванием препарата прибавляют 10 капель краски Гимзы и тотчас же наливают на фиксированный препарат (или погружают препарат в стаканчик с краской). Через 1 час краску сливают, препарат промывают водой, высушивают на воздухе и исследуют.

Познавательные статьи:



Техника прыжка в длину с разбега

Организация работы процедурного кабинета

Области применения синхронных машин

Оптимизация по Винеру и Калману