После выполнения клеткой эфекторной функции она способна осуществлять циторецепцию далее.

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 13 из 25Следующая ⇒

Для оценки функциональной способности ЦТЛ используют ЦТЛ – тест (см. Т система иммунитета) и СКЛ.

Цитолитическое действие НК клеток.

НК – клетки осуществляют цитотоксическое действие в основном контактного цитолиза вирус-инфицированных, опухолевых и инородных клеток.

Уникальность НК клеток состоит в том, что их литическая способность осуществляется при первичном контакте без предварительной сенсибилизации.

Установлено, что мишенями для НК являются клетки, утратившие HLA I класса.

НК клетки распознают на поверхности углеводные компоненты и сахара, связанные с сиаловыми кислотами и недоступные для других.

Контакт с клеткой-мишенью приводит к включению программированного лизиса.

Индуцируют ИЛ – 1, 2, 12, ИФН, ФНО и приводят к усилению цитотоксического действия ЦТЛ.

Пример: ИЛ – 2 активирующий НК клетки (ЛАК клетки), обладают более выраженным цитотоксическим действием и способны вызывать лизис опухолевых клеток, содержащих HLA I класса.

Для выявления и подсчёта НК клеток используют моноклональные АТ (анти-CD-16 и анти-CD-56).

Функциональная активность оценивается в цитотоксическом тесте с клетками-мишенями (пример: клетки опухолевых линий К-562).

Цитолитическое действие макрофагов.

Макрофаги могут вызывать гибель клеток мишеней путём некроза или апоптоза, осуществляя внеклеточный, внутриклеточный и контактный цитолиз.

Усиление функции вызывается цитокинами повышающими внутриклеточный цитолиз макрофагов.

Ряд инфекционных возбудителей (лепра, чума) могут длительно сохраняться в фаголизосомах макрофагов, где не доступны для системы иммунитета.

Единственный способ борьбы с таким внутриклеточными паразитами – активация самих макрофагов.

В частности помощь в стимуляции макрофагов исходит от Тх1 – реакция ГЗТ.

Активированные макрофаги синтезируют ИФН, ФНО и др., а так же становятся способны перерабатывать внутриклеточные объекты.

Внеклеточный цитолиз осуществляется секретируемыми макрофагами бактерицидными продуктами респираторного взрыва, лизосомальными ферментами, цитокинами.

Реакции могут быть усилены при контакте с клеткой-мишенью связанной с опсонинами (как АТ, так и компонентами комплемента) – макрофаги могут быть главными участниками фагоцитоза с участием опсонинов.

Макрофаг имеет Fc рецепторы и посредствам их способен проводить более эффективный лизис мишеней.

Являясь одним из вариантов, как неспецифического иммунитета, так и участвуя в реакциях гуморального иммунитета.

АТ вступающие в реакцию (особенно Ig G, М), вступившие в контакт с бактериальной клеткой или др. АГ активируют систему комплемента.

В результате активации системы комплимента по классическому или альтернативному пути образуется мембран атакующий комплекс (С5 – С9).

Мембран атакующий комплекс приводит к образованию гидрофильного канала, через который проходит вода и микроэлементы, а клетка в итоге гибнет, с другой стороны белки системы комплимента могут выступать как опсонины.

Киллерной активностью обладают и гранулоциты.

(см. АГ представляющие и фагоцитирующие клетки).

Эозинофилы оказывают действие на паразитов по средствам внеклеточного цитолиза, через выработку основного щелочного белка гранул, а их цитотоксическая активность возрастает под действием ИЛ – 5.

Антителозависимая клеточная цитотоксичность (АЗКЦ).

Основная роль принадлежит К – клеткам, хотя возможно участие нейтрофилов, эозинофилов, макрофагов.

В АЗКЦ участвуют три основных компонента:

Киллерная клетка.

Клетка мишень.

3. АТ специфические к АГ клетки-мишени (в основном Ig G, реже Ig М).

В роли клетки-мишени чаще всего выступают собственные клетки организма, изменённые в АГ отношении.

Причины приобретения АГ свойств:

1. Вирусы, химические вещества в т.ч. лекарственные препараты, ферменты, бактериальные токсины – могут изменять АГ структуру клеточных мембран.

2. За счёт конформационных изменений присущих клетке АГ.

3. За счёт повреждения мембраны и появления новых АГ.

4. Образования комплексных АГ с мембраной клетки. Химические вещества могут выступать в роли гаптенов.

После приобретения клеткой АГ свойств на эти АГ образуются Ig G.

Ig G Fab фрагментом может связывать до двух молекул.

Fc рецептор может связываться с клеткой киллером.

В результате обеспечивается более полноценный и быстрый лизис клетки.

Важная роль этих процессов в патогенезе:

 - аутоиммунных заболеваний

(гомологическая анемия, тромбоцитопения и др.).

- патогенез онкопроцессов.

- отторжение трансплантата.

Но механизмы разрушения клеток-мишеней однотипны.

Лекция №9

HLA – система и иммунологическая реактивность.

Иммуногенетику можно считать отдельной самостоятельной наукой с открытием АГ у мышей и формированием понятия о ГКГС. МНС – комплекс был открыт сначала на животных и в последствии был обнаружен у человека МНС человека (HLA – система).

Иммуногенетика включает:

- генетика гистосовместимости

- генетика контроля Ig и цитокинов

- генетика контроля иммунного ответа

- генетика АГ

в настоящее время учение о HLA системе значительно развилось. Сначала развивалась в рамках трансплантологии, а затем вышла за её рамки.

HLA – система – система генов и кодируемых ими антигенов, участвующих в ряде биологических процессов:

- распознавание своего и чужого (противоопухолевый, противоинфекционный, трансплантационный иммунитет)

- обеспечение межклеточных взаимодействий

- генетический контроль иммунного ответа

- генетический контроль активности системы комплемента и др. систем (регуляция специфического и неспецифического иммунного ответа)

- обеспечение предрасположенности к различным заболеваниям (онкологические, аутоиммунные, и др.; считают, что связано со многими заболеваниями).

Основные особенности HLA.

1.

Крайне выраженный полиморфизм (около 700 аллельных вариантов).

2.

HLA АГ обеспечивают взаимодействие всех клеток организма, в том числе и клеток иммунной системы.

Строение.

Комплекс HLA генов локализуется на коротком плече 6й аутосомной хромосомы, справа от центромеры, между геном, кодирующим гипоксалазу и мочевой пепсиноген 5, занимает примерно две сантиморганиды. В её пределах могут размещаться около 10⁵ – 10⁶ генов.

Гены кодирующие HLA.

Выделяют 4 класса:

1. А, В, С…

Е, F, H и др. – функция в настоящее время не установлена.

2. структуры D области

субклонусы D, DR, DQ, DP

...DN, DO – открыты недавно, функция не установлена.

3. кодируют компоненты комплемента

С2, С4а, С4b, BF (пропердиновый фактор)

А так же гены кодирующие цитокины ФНО - α и ФНО – β

Ферменты, участвующие в образовании гормонов

4. – активно изучаются

условно отнесены гены, связь которых с HLA системой нуждается в доказательстве.

Строение.

Гены I класса отличаются очень высоким полиморфизмом.

Для гена А известно более 60 аллельных вариантов

Для В –136

Для С – 38

Гены HLA - I ответственны за образование тяжёлой цепи α антигенов I класса.

Антигены I класса присутствуют практически на всех клетках организма за исключением ранних эмбриональных клеток, эритроцитах, клетках ворсинчатого трофобласта.

В наибольшем количестве HLA - I представлены на лимфоцитах, клетках эпителия и эндотелия. На лимфоцитах их плотность максимальна – до 7000 на 1 клетку (около 1% поверхности).

Экспрессия HLA - I усиливается под влиянием ряда цитокинов (в первую очередь интерферон). В биохимическом отношении – представляют длинный белок, образованный α и β цепями. Цепи α – продукт генов I класса и состоят из трёх доменов α₁, α₂, α₃ имеются трансмембранный и плазматический участки. С доменом α₃ не ковалентно связана β цепь с β₂ микроглобулином, не кодируемым HLA, поэтому вариабельность обусловлена α цепями.

Биологическая функция – обеспечение взаимодействия клеток и полноценного иммунного ответа.

HLA - I – маркёры своего, т.е. клетки несущие эти молекулы в норме не лизируются цитотоксическими лимфоцитами.

HLA - I могут выступать в качестве рецепторов для чужеродных антигенов, важны при иммунном ответе.

В процессе иммунного ответа HLA - I принадлежит ведущая роль во взаимодействии между клеткой эффектором и клеткой мишенью.

Гены и АГ HLA – II.

Им так же присущ полиморфизм.

Ответственны за синтез как α так и β цепей АГ данного класса. Причём высокий полиморфизм обеспечивают β цепи. Генов β цепи HLA – DR – 137 вариантов, а α только два.

АГ HLA - II в основном присутствуют на АГ представляющих клетках (дендритные клетки, макрофаги, лимфоциты), на ряде активированных клеток (Т-лимфоциты, эндотелиальные, эпителиальные, тучные и др. клетки). Экспрессия HLA - II усиливается под действием γ – ИНФ и подавляется в частности простагландином Е₂.

Строение АГ.

Молекула – гетеродимер, состоящий из α и β цепей, не ковалентно связанных с между собой α₁α₂ и β₁β₂ в каждой цепи различают:

- внеклеточную часть

- трансмембранную часть

- цитоплазматическую часть

всё это позволяет говорить об общности эволюции генома HLA АГ, как о наиболее древнем механизме, чем распознавание с помощью АТ.

HLA – II обеспечивают взаимодействие иммунокомпетентных клеток, опосредуют кооперацию Т и В лимфоцитов и макрофагов в иммунном ответе (трёх клеточная кооперация). Играет решающее значение в реакциях трансплантационного иммунитета, супрессии гуморального и клеточного иммунного ответа. В основном HLA – II связаны гены, контролирующие интенсивность иммунного ответа IR гены.

Однако в процессе иммунного ответа прослеживается тесная взаимосвязь HLA - I и HLA - II (сцепление IR с HLA генов). С ними обусловлены многие случаи ассоциирующие разнообразные патологии с определённым HLA гаплотипом.

Ассоциации заболеваний с HLA системой.

На основе HLA системы пытались создать группы риска.

CCR ген (CCR – 5) - корецептор HLA системы определяет предрасположенность к СПИДу.

Изучение механизмов взаимосвязи HLA системы и заболеваний выделяют два вида:

- генетическая детерминированость

- генетическая ассоциация

Генетическая детерминированость – истинное сцепление патологического гена с HLA АГ, при этом передаётся по наследству (встречается крайне редко) (пример: дефицит определённых компонентов комплемента).

Генетическая ассоциация – встречается более часто и в её отношении несколько гипотез:

- Рецепторная гипотеза, рассматривает HLA АГ как рецепторы для вирусов, к которым они прикрепляются и проникают в клетку.

- Гипотеза молекулярной мимикрии – основана на структурном сходстве HLA АГ и АГ определённых вирусов, бактерий в результате организм распознаёт их АГ как свои и остаётся к ним толерантным.

- Модификация HLA АГ основана на том, что действия инфекционных и неинфекционных агентов могут изменять HLA АГ и расцениваться организмом как чужеродные, приводя к индукции аутоиммунных процессов.

Два отечественных коллектива выдвинули и экспертно доказали, что среди HLA структур имеются генетические образования, предрасполагающие к нежелательному перерождению системы в целом (пример: нормальное кроветворение в гемобластное, нормальной эндокринной активности в активность по типу сахарного диабета) (группы АГ изменение которой ведёт к поражению жизненно важной системы).

Методы определения HLA АГ.

HLA - I АГ определяют цитотоксическим тестом.

Суспензию лимфоцитов смешивают с сывороткой содержащей АТ к АГ HLA, комплемент с красителем (трипановый синий, эозин). В случае присутствия АГ комплиментарного АТ, то в присутствие комплемента наблюдается повреждение мембран лимфоцитов в связи, с чем изменяется их окраска.

Реакция лейкоаглютинации – склеивание лейкоцитов в конгломераты при влиянии специфических иммунных сывороток.

Установка соответствующего HLA донора и реципиента.

HLA - II тестируются в смешанной культуре лимфоцитов (СКЛ).

Смешивают лимфоциты донора и реципиента, инкубируют 3 – 6 дней, если происходит трансформация примерно 30% лимфоцитов в лимфобласты, результат оценивают, считая, что сила реакции зависит от степени генетической несовместимости донора и реципиента, как результат стимуляции HLA АГ.

Реакцию учитывают с использованием светового микроскопа или радиоиммунным методом. Учитывая по включению ³Н-тимидина в ДНК лимфоцитов.

Результат считается отрицательным, если обнаруживается не более 15% бластных форм лимфоцитов.

Экспресс метод оценки. Считают, что СКЛ – это ответ в фазе иммунного распознавания, но можно считать, что реакция отражает пролиферативную способность лимфоцитов; в т.ч. и лимфоцитарную цитотоксичность – используют в тесте лимфоцитотоксичности.

Оценка цитотоксичности может использоваться и в СКЛ.

Лимфоциты мишени инкубируют с митогеном (в частности ⁵¹Cr) и в эту систему вносятся цитотоксические лимфоциты, меченные радиоактивным стимулятором. Киллерный эффект учитывают по высвобождению метки.

Метод PCR диагностики.

Основан на определении структурных особенностей ДНК, особенно HLA - I и HLA - II.

Часть II:

Прикладная иммунология.

Лекция №10

Возрастная иммунология.

Особенности развития иммунной системы в эмбриогенезе.

Первичным источником стволовых клеток является желточный мешок, на 6 неделе клетки мигрируют, образуя печень, тимус, ККМ.

Корковое и мозговое вещество тимуса и TCR рецепторы способны функционировать уже на 14 недели развития, селезёнка на 5 - 6 неделе.

Начало активного функционирования ККМ начинается с 11 - 12 недели, активно заселяется лимфоцитами, но основным источником клеток до 15 - 16 недели служит печень.

Лимфоциты к 12 неделе составляют до 50% всех клеток, с выделением Т-лимфоцитов на 12 неделе, уже на 12 - 16 неделях становятся различимы Т-хелперы и Т-супрессоры, В-лимфоциты появляются на 9 неделе.

На В-лимфоцитах появляется Ig М, потом его плотность уменьшается, на смену приходят Ig D, а за ними Ig G, А, Е, т.е. онтогенез лимфоцитов полностью сохраняется.

Способность образовывать плазматические клетки (активно продуцировать Ig) обнаруживается с 10 - 12 недель.

Через плаценту способны проникать Ig G кроме Ig G2.

Ig G связывается с Fc рецептором на поверхности трофобласта, комплекс подвергается пиноцитозу и проникает в кровоток плода.

Иммунная система плода при контакте с интактным АГ - продуцирует Ig М., Поэтому повышение содержания Ig М в пупочной вене выше 0,3 г/л свидетельствует о первичном инфицировании плода.

Синтез Ig А начинается только после рождения.

Ig М через плаценту не проникает, в результате новорождённый не защищён от грамм отрицательной флоры.

Неспецифические факторы.

Система комплимента развивается позже Т и В систем.

Через плацентарный барьер её компоненты не проникают.

Первыми начинают синтезироваться

На 8 неделе - С3, С4, С5;

На 16 неделе - С7 и С9.

И только к 19 неделе плод содержит все компоненты системы комплемента.

Фагоцитирующие клетки.

Гранулоциты появляются на 2 месяц.

Изначально в печени и только к 5 месяцу главным продуцентом становится ККМ.

В функциональном отношении гранулоциты и макрофаги отличаются низким хемотаксисом, адгезией, бактерицидностью и как следствие менее активны, чем у взрослых.

Но всё же в иммунном отношении плод достаточно компетентен.

Познавательные статьи:



Формы дистанционного обучения

Передача мяча двумя руками снизу

Значение правильной осанки для жизнедеятельности человека

Основные ошибки при выполнении передач мяча на месте