Модель аудиогенной судорожной активности. Аудиогенный киндлинг

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 13 из 40Следующая ⇒

В работе были использованы крысы линии Крушинского-Молодкиной (КМ), генетически предрасположенных к аудиогенной судорожной активности. Они были разделены на две группы. Первая группа это крысы, не подвергавшиеся звуковому воздействию (n=10). Вторая - крысы, которым давались периодические кратковременные (до 90 сек.) предъявления звукового стимула (1 раз в день) в течение 40 дней (аудиогенный киндлинг) (n=4).

В опытах с хронической звуковой стимуляцией использовались самцы крыс линии КМ массой 200-250 граммов, которые содержались в условиях вивария при постоянных температурных условиях и продолжительности светового периода 12 часов. Предварительно, животные тестировались по продолжительности и интенсивности аудиогенной судорожной реакции в ответ на действие звука (115 дБ, 12-16 кГц, 90 сек.) по 4-х бальной шкале (Батуев и др., 1997).

1 балл - двигательное возбуждение, бег, прыжки

2 балла - двигательное возбуждение заканчивается внезапным ступорозным состоянием с падением животного на брюшко.

3 балла – 2 балла + падение животного на бок с резкими клоническими судорогами.

4 балла – 3 балла + тоническое напряжение всей мускулатуры и временная остановка дыхания.

Хроническая стимуляция, проводимая в течение 21 дня звуковыми стимулами интенсивностью 75 дБ до начала двигательного возбуждения (но не более 90 секунд), приводила к постепенному увеличению продолжительности и интенсивности аудиогенной судорожной реакции от реакции в 2,5 ± 0,4 бала с латентным периодом 5-7 сек. к реакции в 3,5 ± 0,6 балла с латентным периодом 2-5 сек., включающей миоклонические гиперкинезы. Дальнейшее продолжение ежедневной стимуляции до 40 дней усиливало выраженность этих реакций. Использование более длительной стимуляции не приводило к дальнейшим изменениям. Поэтому через 40 дней звуковые стимулы прекращались. Полученное состояние сохранялось, по крайней мере, в течение одной недели без предъявления звука. После этого животных декапитировали и выделяли срезы гиппокампа для последующего анализа.

Использованные вещества

Вещества для приготовления рабочих растворов были приобретены в фирме Sigma (Dorset, Великобритания), специфические агонисты, антагонисты и модуляторы рецепторов в Tocris Cookson LTD (Bristol, Великобритания), QX314Br в TCS Biologycals (Buckinghamshire, Великобритания), тетродотоксин в Latoxan (Valence, Франция). Рабочий раствор Рингера и раствор для резки срезов готовился на основе бидистиллированной или деионизованной воды перед каждым экспериментом из маточного раствора, содержащего все компоненты кроме глюкозы и CaCl₂, которые добавлялись в последнюю очередь. Агонисты и антагонисты готовились в объеме необходимом для проведения нескольких экспериментов и замораживались в эппендорфах. В качестве растворителя использовалась деионизированная вода, DMSO или эквимолярная концентрация NaOH (NaOH э.м.). В качестве маточного раствора пентобарбитала использовался раствор, применяемый при эфтаназии (60 мг/мл). Раствор тетродотоксина готовился при введении с помощью шприца в запаянный флакон растворителя (слабого раствора уксусной кислоты) в необходимом объеме. Использованные в работе вещества и их концентрации приведены в таблице 2.1

Таблица 2.1 Использованные вещества

Статистический анализ

Экспериментальные данные каждой серии (n≥4) были усреднены и представлены в виде средняя ± стандартная ошибка средней. Достоверность различий данных оценивалась с использованием парного или непарного t‑теста и однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA). Различия считались достоверными при P<0,05. Аппроксимирующие кривые на графиках рассчитывались по методу наименьших квадратов.

Познавательные статьи:



Техника нижней прямой подачи мяча

Комплекс физических упражнений для развития мышц плечевого пояса

Стандарт Порядок надевания противочумного костюма

Общеразвивающие упражнения без предметов