Исходы взаимодействия вирусов с клеткой хозяина

↑

⇐ ПредыдущаяСтр 2 из 7Следующая ⇒

1. Продуктивный процесс -репликация (продукция) вирусов. Приводит к гибели (лизису) клеток. Цитопатический эффект является результатом интенсивного размножения и формирования большого количества вирусных частиц (характерный результат продуктивного процесса), вызванного вирусами с высокой цитопатогенностью. Цитопатический эффект действия на клеточные культуры для многих вирусов носит узнаваемый специфический характер;

2. Интегративный процесс -интеграция вирусного генома с геномом клетки хозяина (вирогения). Это особый вариант продуктивного процесса по типу стабильного взаимодействия. Вирус реплицируется вместе с геномом клетки хозяина и может длительно находиться в латентном состоянии. Встраиваться в ДНК - геном хозяина могут только ДНК- вирусы (принцип “ДНК - в ДНК”). Единственные РНК - вирусы, способные интегрироваться в геном клетки хозяина - ретровирусы, имеют для этого специальный механизм. Синтез ДНК провируса на основе геномной РНК с помощью фермента обратной транскриптазы (ревертазы) с последующим встраиванием ДНК в геном хозяина.

3. Абортивный процесс -клетки освобождаются от вируса, не вызывая появление дочерней популяции. При инфицировании дефектным вирусом, для репликации которого нужен вирус- помощник, самостоятельная репликация этих вирусов невозможна. Например, вирус дельта (D) гепатита может реплицироваться только при наличии вируса гепатита B, его HВs – антигена. При инфицировании вирусом генетически нечувствительных к нему клеток или при заражении чувствительных клеток вирусом в неблагоприятных условиях.

Вирусологический метод. Культивирование вирусов

Лабораторные методы диагностики вирусных инфекций включают вирусоскопию, выделение и идентификацию возбудителя (вирусологический метод), обнаружение и определение титра противовирусных антител (серологический метод), обнаружение антигенов вируса в исследуемом материале (РИФ, РНИФ, ИФА), обнаружение генетического материала вирусов (ПЦР) (табл. 35).

Таблица 35. Методы диагностики вирусных инфекций

1. Вирусоскопический метод
а) световая микроскопия	применяется для обнаружения крупных вирусов (оспы) в окраске по Морозову и внутриклеточных вирусных включений в окраске по Туревичу и Муромцеву
б) электронная микроскопия	дает возможность изучить ультраструктуру вириона
е) метод иммунной электронной микроскопии в основе этого метода лежит взаимодействие антител с вирусами при смешивании вируссодержащего материала со специфической сывороткой	в результате реакции образуется микропреципитаты, состоящие из вирусных частиц, покрытых своеобразным «венчиком»
г) иммунофлюоресцентный метод (прямой и непрямой) с использованием флюоресцирующих сывороток	при положительной реакции в люминесцентном микроскопе наблюдается специфическое свечение. Применяется для экспресс-диагностики.
2. Вирусологический метод Этот метод основан на культивировании вирусов с использованием культур клеток или куриных эмбрионов и их последующей индикации и идентификации.
Индикацию вирусов осуществляют 1. по характеру специфических поражений оболочек и тела эмбриона 2. по феномену гемагглютинации 3. по цитопатическому действию вируса (ЦПД) 4. по образованию в клетках включений 5. по образованию бляшек 6. по феномену гемадсорбции 7. по «цветной» реакции	Для сероидентификации вирусовиспользуют материал от больного (смыв из носоглотки), аллантоисную или амниотическую жидкость заражённого куриного эмбриона, культуру клеток и ставят реакции: а) торможения (задержки) гемагглютинации (РТГА) б) торможения (задержки) гемадсорбции (РТГАд) в) связывания комплемента (РСК) г) нейтрализации (РН) д) ИФА Для генетической идентификации – ПЦР, МГ
3. Серологический метод
Применяется для обнаружения в сыворотке крова больного специфических противовирусных антител в реакциях (РТГА, РСК, ИФА и др)	определяют титр антител в парных сыворотках в этих реакциях используются антигены вирусов (диагностикумы)
4. Биологический метод
Основан на использовании чувствительных лабораторных животных	применяют для культивирования, индикации и идентификации вирусов, изучение клинических симптомов и патоморфологических изменений

Вирусологический метод направлен на выделение и идентификацию вируса и является «золотым стандартом» в диагностике вирусных инфекций. Вирусы являются облигатными внутриклеточными паразитами, в связи с этим, вирусологический метод имеет ряд принципиальных особенностей. Схема вирусологического метода включает ряд последовательных этапов: 1) забор, транспорт и подготовка исследуемого материала, 2) культивирование, 3) индикация и 4) идентификация вирусов (табл. 36).

При заборе материала для исследований необходимо отбирать образцы с учетом локализации первичной репликации и ритма циркуляции возбудителя. Образцы следует доставлять в лабораторию незамедлительно, при относительно кратковременной транспортировке (не более 5 суток) образцы сохраняют на льду, при более длительной – при tºC -50ºC.

Таблица 36. Схема вирусологического метода

Подготовка исследуемого материала	Клинический материал обычно содержит смесь бактерий и вирусов, с целью их разделения проводят: · фильтрацию (бактериальные фильтры) · центрифугирование · антибактериальную деконтаминацию (антибиотики широкого спектра действия – бензилпенициллин, стрептомицин и др.)
Культивирование вирусов	Вирусы размножаются только в живых клетках, соответственно используются следующие способы культивирования: · куриные эмбрионы · лабораторные животные · культуры клеток (клеточные культуры) – первичные, полуперевиваемые, перевиваемые
Индикация вирусов	Цель данного этапа – выявление вируса. Вирусы являются ультрамикроскопическими микроорганизмами и для их визуализации используют специальные (опосредованные) методы: · цитопатогенного действия (ЦПД) вирусов (деструкция монослоя культуры клеток, формирование внутриклеточных включений, синцития и симпластов и др.) · образования бляшек · реакции гемагглютинации (РГА) · гемадсорбции · «цветной» реакции (подавление метаболической активности)
Идентификация вирусов	После обнаружения вируса необходимо определить тип этого вируса. Существует два вида идентификации: · сероидентификация (вирус – неизвестный антиген, для его идентификации необходимы известные антитела – диагностические сыворотки) ИФА, РСК, РТГА, РН и др. · геноидентификация (определение генома) ПЦР, ДНК-гибридизация (МГ)

⇐ Предыдущая 123 4 5 6 7 Следующая ⇒

Познавательные статьи:

Техника прыжка в длину с разбега

Тактические действия в защите

История Олимпийских игр

История развития права интеллектуальной собственности

Последнее изменение этой страницы: 2017-01-19; просмотров: 233; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы!

infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 216.73.217.128 (0.018 с.)