Постановка рдп на предметному склі

↑

▷ Содержание

⇐ ПредыдущаяСтр 7 из 10Следующая ⇒

Знежирене предметне скло кладуть на холодну поверхню. Піпеткою набирають агаровий гель (температура 60^оС) і виливають його спочатку по периметру скла, а потім – заповнюють його середину. Шар агару, товщиною 1,5 – 2 мм загусає через 3 – 10 хвилин. Після цього в агарі спеціальним штампом або скляною трубочкою вирізають лунки діаметром 4-5 мм. Кількість лунок та їх розміщення залежить від мети постановки РДП (рис.8.1- 8.3).

Рис.8.1 Розміщення компонентів реакції при ідентифікації вірусу в патологічному матеріалі і при проведенні ретроспективної діагностики

Агар з лунок відбирають голкою, учнівським пером і т.п. Лунки необхідно додатково залити невеликою кількістю агару для того, щоб компоненти реакції (сироватка або антиген) не підтікали під скло. Для цього в лунку пастерівською піпеткою (мікро піпеткою) вносять гарячий агар і одразу же відсмоктують його. Це робиться для того, щоб гель встиг тонким шаром покрити дно та стінки лунки.

ПМ,

Суспензія патологічного матеріалу

всі вільні лунки на периферії штампа

АГф+,

позитивний контроль,

фабричний антиген,

збудник імовірної хвороби,

діагностичний набір

2 лунки на чашку Петрі,

1 лунка – на скло.

АГф -,

Негативний контроль,

фабричний антиген

збудник іншої хвороби

діагностичний набір

2 лунки на чашку Петрі,

1 лунка – на скло.

АТ ф,

позитивна сироватка від імунізованих даним збудником

лабораторних тварин, діагностичний набір

Рис.8.2 Розміщення компонентів реакції під час проведення ідентифікації вірусу з патологічного матеріалу від хворих і мертвих тварин.

АТд,

дослідні антитіла,

Сироватка від хворих тварин або реконвалесцентів

всі вільні лунки на периферії штампа

К+,

позитивний контроль,

фабрична сироватка від

імунізованих тварин,

діагностичний набір

2 лунки на чашку Петрі,

1 лунка – на скло.

К -,

Негативний контроль,

фабрична сироватка від тварин

імунізованих іншим збудником,

діагностичний набір

2 лунки на чашку Петрі,

1 лунка – на скло.

АГ ф,

фабричний антиген, діагностичний набір

Рис.8.3 Розміщення компонентів реакції під час проведення ретроспективної діагностики (відбір сироватки крові від вакцинованих, хворих або інфікованих тварин).

В підготовані лунки по схемі, маленькими краплями заливають компоненти реакції. Потім предметне скло кладуть в вологу камеру, для якої використовують ексикатор або чашку Петрі з вологою ватою або папером. Вологу камеру залишають при кімнатній температурі або ставлять в термостат. Після необхідного терміну (1-2 доби) проводять облік результатів реакції.

ЗАВДАННЯ.

1. Показати розміщення реагентів і результати РДП при проведенні:

· ідентифікації вірусу із патологічного матеріалу на предметному склі

· ідентифікації вірусу із патологічного матеріалу в чашці Петрі

· проведення ретроспективної діагностики на предметному склі

· проведення ретроспективної діагностики в чашці Петрі

2. Виготовлення агару для РДП.

3. Очищення агару для РДП.

4. Підготовка посуду для РДП.

5. Переваги і недоліки РДП.

Заняття №9

Визначення титру вірусів.

Поняття про титр вірусів.

Познавательные статьи:



Алгоритмические операторы Matlab

Конструирование и порядок расчёта дорожной одежды

Исследования учёных: почему помогают молитвы?

Почему терпят неудачу многие предприниматели?